Jornal de Patologia Vegetal e Microbiologia

Abstrato

Amplificação isotérmica mediada por loop de imunocaptura para detecção rápida do vírus do enrolamento amarelo da folha do tomateiro (TYLCV) sem extração de DNA

Mohammad Amin Almasi, Seyedmohammad Hosseyni Dehabadi e Zahra Eftekhari

Para diminuir o tempo necessário para alguns ensaios de diagnóstico, incluindo reação em cadeia da polimerase (PCR), amplificação isotérmica mediada por loop (LAMP; devido principalmente à etapa de extração de DNA) e também DAS-ELISA em um nível mínimo, um protocolo inovador de imunocaptura LAMP (IC–LAMP) e imunocaptura PCR (IC-PCR) com base no genoma do Tomato Yellow Leaf Curl Virus (TYLCV) foi usado e otimizado. Embora os ensaios DAS-ELISA, IC-PCR e IC–LAMP pudessem detectar com sucesso amostras positivas de plantas infectadas, considerando o tempo, a segurança, a sensibilidade, o custo, a ausência de necessidade de extração de DNA e a simplicidade, o último foi superior no geral. O azul de hidroxinaftol pode produzir mudança de cor e brilho estáveis ​​e longos em uma abordagem baseada em tubo fechado para evitar o risco de contaminação cruzada. No geral, como o IC–LAMP é sensível, econômico, bastante amigável ao usuário e também pode gerar resultados mais precisos do que os procedimentos de diagnóstico anteriores, propomos este ensaio como um sistema de reconhecimento viral alternativo altamente confiável em relação ao reconhecimento do TYLCV e provavelmente outras doenças de base viral.