Bioquímica e Bioquímica Analítica

Abstrato

Identificação das principais proteínas de um complexo multiproteico de elevada massa molecular muito estável do tecido placentário humano que possui nove atividades catalíticas diferentes

Evgeniya E Burkova, Pavel S Dmitrenok, Dmitrii V Bulgakov, Evgeny A Ermakov, Valentina N Buneva, Svetlana E Soboleva1 e Georgy A Nevinsky*

A placenta humana é um órgão que protege, alimenta e regula o desenvolvimento do embrião. Assim sendo, a identificação e caracterização dos componentes da placenta, incluindo as proteínas e os seus complexos multiproteicos, é um passo importante para a compreensão da função da placenta. Aqui analisamos pela primeira vez o complexo multiproteico extremamente estável de placentas humanas (SPC, ~ 1000 kDa) por espectrometria MALDI MS e MS / MS utilizando proteínas hidrolisadas trípticas após separação de proteínas por SDS-PAGE e eletroforese 2-D. A formação de um complexo tão estável devido à associação aleatória de várias proteínas é muito improvável. Foi demonstrado que os SPC contêm doze proteínas: hemoglobina, fosfatase alcalina, actina citoplasmática, albumina sérica humana, hormona somatomamotropina coriónica, proteína de choque térmico beta-1, peroxiredoxina-1, proteína regulada pela glicose de 78 kDa, proteína dissulfeto isomerase A3, serotransferrina, anexina A5 e IgGs. Estas doze proteínas têm em si muitas funções biológicas diferentes e importantes, que podem ser inerentes a estas proteínas do complexo. Além disso, o complexo demonstrou nove atividades enzimáticas diferentes: DNase, RNase, ATPase, fosfatase, protease, amilase, catalase, peroxidase (dependente de H2O2) e oxidoredutase (independente de H2O2). A eficiência da catálise de cada uma destas reações pelas preparações de SPC de três placentas foi comparável. Foi demonstrado que a hidrólise de r(pU)23, r(pA)23 e r(pC)23 leva à formação de oligonucleótidos 1-22-mer, enquanto a digestão do microRNA mirR137 é específica do local (3A-4U > 9U- 10A > 8U-9U ≥ 15U-16A) resultando na formação de apenas quatro produtos principais. É considerado um grande número de funções potencialmente possíveis do complexo de acordo com as funções das suas proteínas individuais. O progresso no estudo dos complexos proteicos placentários pode promover a compreensão das suas funções biológicas.