Jornal de Bacteriologia e Parasitologia

Abstrato

Identificação e caracterização de uma família de proteínas da membrana externa de Helicobacter pylori , que capturam ferro de fontes humanas

Marco Antonio Gonzalez-Lopez, Cristhian Sanchez-Cruz, José de Jesus Olivares-Trejo

Introdução: Helicobacter pylori é uma bactéria espiral gram-negativa, tem sido associada a úlceras pépticas, gastrite, duodenite e acredita-se que seja o agente causador do câncer gástrico. As fontes como lactoferrina humana, heme e hemoglobina podem dar suporte ao crescimento de H. pylori . No entanto, ainda não se sabe completamente como ocorre o processo de aquisição de ferro. Uma análise in silico mostrou que o genoma de H. pylori tem uma família de três proteínas de membrana externa reguladas por ferro (FrpB). Duas delas: FrpB1 e FrpB2 foram purificadas como proteínas recombinantes e sua capacidade de ligação ao heme ou hemoglobina foi demonstrada. Infelizmente, a última proteína da família (FrpB3) não foi investigada.

Métodos: Neste trabalho, FrpB3 foi purificado por cromatografia de afinidade de heme e sua capacidade de ligação ao heme foi analisada. Esta proteína foi identificada por espectrometria de massa e sua expressão foi quantificada por técnica em tempo real sob diferentes fontes de ferro humano. Esta expressão foi comparada com frpB1 e frpb2. A estrutura de FrpB3 foi analisada por modelo 3D para visualizar os motivos necessários para a ligação de Hb, e também foi comparada com as estruturas de FrpB1 e FrpB2.

Resultados: A proteína identificada foi FrpB3, seu respectivo gene foi superexpresso com hemoglobina. FrpB1 foi superexpresso com heme enquanto FrpB2 foi induzido na presença de heme e também hemoglobina. Ambos os modelos 3D mostraram que eles são estruturalmente conservados porque eles têm a estrutura típica de barril, que é inserida na membrana, também, os motivos necessários para a ligação de Hb foram identificados em todas as estruturas.

Conclusão: H. pylori expressa proteínas FrpB1, FrpB2 e FrpB3 para capturar ferro e elas são reguladas de acordo com a disponibilidade da fonte de ferro, talvez para suportar o ambiente extremo presente no estômago. Nossos resultados gerais representam o esforço para explicar a importância da aquisição de ferro.