Jornal de pesquisa e terapia com células-tronco

Abstrato

Células estromais mesenquimais derivadas de medula óssea alogénica humana e tecido adiposo induzem reatividade de células T citotóxicas CD8+

Marieke Roemeling-van Rhijn, Marlies E Reinders, Marcella Franquesa, Anja U Engela, Sander S Korevaar, Helene Roelofs, Jan NM IJzermans, Michiel GH Betjes, Carla C Baan, Willem Weimar e Martin J Hoogduijn

Introdução: Para aplicações clínicas, as Células Estromais Mesenquimais (CTM) podem ser isoladas a partir de medula óssea e tecido adiposo de origem autóloga ou alogénica. A utilização de células alogénicas tem vantagens, mas pode apresentar o risco de sensibilização contra HLA estranho. Assim sendo, avaliámos se as CTM derivadas da medula óssea e do tecido adiposo são capazes de induzir alorreatividade HLA-específica. Métodos: As CTM foram isoladas de dadores de medula óssea humana saudável (BM-MSC) e de tecido adiposo (ASC). As células mononucleares do sangue periférico (PBMC) foram co-cultivadas com BM-MSC incompatíveis com HLA-AB ou ASC pré-cultivadas com ou sem IFNy. Após isolamento através de rastreio FACS, as populações efetoras T CD8+ educadas foram expostas durante 4 horas a MSC marcadas com Európio da mesma composição HLA que nas co-culturas ou com HLA diferentes. A lise das CTM foi determinada por medição espectrofotométrica da libertação de Európio. Resultados: As células T CD8+ educadas com BM-MSC foram capazes de lise HLA específica de BM-MSC. A lise máxima foi de 24% numa relação efetor:alvo (E:T) de 40:1. A exposição ao IFNγ aumentou a expressão de HLA-I nas BM-MSC e aumentou a lise para 48%. A co-cultura de PBMC com BM-MSC estimulada por IFNγ aumentou ainda mais a lise para 76%. Surpreendentemente, a lise induzida pelo ASC foi significativamente menor. As células T CD8+ educadas com ASC induziram uma lise máxima de 13% e as células T CD8+ educadas com ASC estimuladas por IFNγ de apenas 31%. Conclusão: As BM-MSC alogénicas e, em menor medida, as ASC, são capazes de induzir reatividade HLA específica. Os nossos resultados sugerem que a terapia clínica com CTM alogénicas deve ser cuidadosamente considerada.