Bioquímica e Bioquímica Analítica

Abstrato

Como a alfa-lactoalbumina humana reconhece o ADN e o ARN

Nevinsky GA, Alinovskaya LI, Ivanisenko NV, Soboleva SE e Sedykh SE

A α-lactoalbumina (LA) humana tem uma importante função nas células mamárias, ativa as caspases envolvendo a apoptose. O complexo LA interage com o ADN das células tumorais com as histonas e prejudica a estrutura da cromatina. Não existem dados sobre a forma como o LA reconhece o ADN e interage com as histonas e o ADN da cromatina. A abordagem do aumento gradual da complexidade do ligante foi utilizada para estimar a contribuição relativa de cada unidade de nucleótidos de ADN para a sua afinidade total pelo LA humano. Foi demonstrado que os ligantes mínimos do sítio de ligação ao ADN do LA são o ortofosfato e todos os dNMPs e rNMPs (Kd=(5,0-43)×10-5). A contribuição máxima para a afinidade total foi observada para três unidades de nucleótidos de todos os (pN)n com uma diminuição significativa na ordem 1>2>3, em n=4-6 foi notavelmente menor e em n ≥ 6-7 todos os dependências de -logKd após n atingir os patamares. A dupla fita (pN)n apresentou uma afinidade significativamente menor em comparação com os ligantes de fita simples. Foram estimados os parâmetros termodinâmicos que caracterizam a contribuição específica de (pN)1-6 cada ligação nucleotídica (ΔGo) para a sua afinidade total pelo AL. O modelo espacial do complexo LA-DNA foi calculado. A sequência da proteína LA apresenta homologia com as de cinco histonas (H1-H4) envolvidas nas interações do núcleo da cromatina entre si e o seu complexo com o ADN. Supõe-se que a homologia pode ser a principal razão para a interação do AL com o ADN da cromatina, levando à quebra da sua estrutura, bem como à ligação adequada das histonas entre si e com o ADN.