Jornal de pesquisa e terapia com células-tronco

Abstrato

Avaliação histomorfométrica da regeneração óssea induzida por andaimes biodegradáveis ​​como transportadores de células estaminais da polpa dentária num modelo de rato com defeito de "tamanho crítico" na calvária

Susanna Annibali, Roberta Quaranta, Antonio Scarano, Andrea Pilloni, Andrea Cicconetti, Maria Paola Cristalli, Diana Bellavia e Livia Ottolenghi

Objectivo: O objectivo deste estudo foi testar células estaminais específicas que pudessem melhorar a formação óssea em combinação com estruturas específicas.

Métodos: As células estaminais da polpa dentária (DPSCs) foram semeadas com Osso Bovino Desproteinizado Granular (GDPB) ou Fosfato Beta-Tricálcico (ß-TCP) num modelo de rato com um defeito de "tamanho crítico" na calvária. As DPSCs foram isoladas de dentes humanos permanentes, obtidas e caracterizadas utilizando marcadores específicos de células estaminais (Nanog e Oct-4) por PCR em tempo real e imunofluorescência. As células foram diferenciadas durante 10-15 dias para o fenótipo osteoblástico com 100μM de ácido L-ascórbico, adicionado todos os dias em meio de cultura e 20 vol. percentagem de SFB em meio α-MEM. O comprometimento osteogénico foi avaliado com PCR em tempo real através da medição da expressão de marcadores específicos (osteonectina e runx2). Quando foi obtido um número suficiente de células, as DPSCs foram tripsinizadas, lavadas em meio de cultura e semeadas no GDPB e na estrutura de ß-TCP com uma densidade de 0,5-1x106 células/estrutura. Dois defeitos circulares bilaterais de tamanho crítico (5 mm de diâmetro; 1 mm de espessura) foram criados a partir do osso parietal de 8 ratos nus deficientes em células T atímicas. Um defeito craniano de cada rato foi preenchido apenas com a estrutura e o outro defeito com a estrutura semeada com células estaminais. Após 12 semanas de pós-operatório os animais foram eutanasiados e realizada análise histomorfométrica. As diferenças entre os grupos foram analisadas por análise de variância unidirecional (ANOVA) seguida do teste post-hoc de diferença mínima significativa protegida de Fisher (PLSD). Um valor de p <0,05 foi considerado estatisticamente significativo.

Resultados: O grupo GDPB apresentou uma maior percentagem de osso lamelar que o GDPB/DPSC, o ß-TCP sozinho apresentou níveis mais baixos em comparação com o ß-TCP/DPSC. A adição de células estaminais aumentou significativamente a formação óssea tecida em ambos os implantes baseados em andaimes , embora ainda maior nos implantes baseados em GDPB

Conclusão: As nossas descobertas indicam que o GDPB e o ß-TCP utilizados como estrutura para induzir a regeneração óssea podem beneficiar da adição de DPSC às construções de engenharia de tecidos.