Jornal de pesquisa e terapia com células-tronco

Abstrato

Orientações para otimizar as capacidades de sobrevivência e migração das células estaminais mesenquimais equinas

Sarah Broeckx, Cynthia de Vries, Marc Suls, Deborah J Guest e Jan H Spaas

Enquadramento: Embora a terapia com células estaminais mesenquimais (MSC) seja comummente utilizada na medicina veterinária , não está descrita nenhuma diretriz específica para garantir uma sobrevivência e migração celular ótima. No entanto, isto é indispensável para garantir uma utilização clínica óptima. Métodos: No presente estudo foram isoladas e caracterizadas CTMs derivadas de sangue periférico (PB) equino. De forma a determinar os parâmetros ótimos para a criopreservação a longo prazo , os efeitos de diferentes concentrações de dimetilsulfóxido (DMSO) (5-20%) e métodos de descongelação (temperatura controlada ou descongelação manual) na viabilidade das CTM foram avaliados através de tripano. Posteriormente, o armazenamento das CTM foi avaliado durante 12 meses utilizando apenas 10% de DMSO como crioprotetor sem congelação com taxa controlada. De seguida, avaliou-se a influência dos anestésicos e géis injetáveis ​​frequentemente utilizados na viabilidade das CTM. Por fim, foi avaliada a capacidade de migração das CTMs através do ácido hialurónico em diferentes concentrações. Resultados: Em primeiro lugar, demonstrámos que a concentração de DMSO e o método de descongelação não tiveram uma influência considerável na viabilidade das CTM na avaliação das 4 horas após a descongelação. Em segundo lugar, os anestésicos eram altamente citotóxicos e apenas 10% das CTM sobreviveram 3 horas da sua presença. Os géis à base de ácido hialurónico e glicosaminoglicanos foram compatíveis com as CTM e permitiram uma elevada sobrevivência celular (superior a 90%) em 48 horas de seguimento. No entanto, num gel de poliacrilamida, aproximadamente 80% das CTM morreram em 48 horas. Por fim, a concentração do gel influenciou a capacidade de migração das CTM. De facto, apenas 60% das CTM em 20mg/ml de ácido hialurónico aderiram à superfície subjacente em 48 horas, enquanto quase 100% das CTM em 10mg/ml da mesma substância foram capazes de migrar através do gel. Conclusão: O presente estudo reporta as orientações práticas para a aplicação clínica das CTM derivadas de PB equinos.