Biologia e Medicina

Abstrato

Geração e Caracterização de Anticorpos IgY de Galinhas Lohmann Brown Imunizadas com Salmonella spp. para a sua posterior aplicação em Nanoterapia

Gordon G, Morán G, Ayala L, Seqqat R, Fernández R e Torres M

A salmonelose é um tipo comum de intoxicação alimentar causada pela bactéria Salmonella enterica. Esta doença é comum no Equador e propaga-se através das aves. Uma nova alternativa para o controlo da infecção em humanos e animais é através da imunidade passiva. Consequentemente, podem ser desenvolvidos anticorpos específicos como agentes terapêuticos baseados em lipossomas de nanopartículas biodegradáveis. Os anticorpos específicos são produzidos pela inoculação de antigénios específicos em galinhas, seguida da recuperação dos anticorpos acumulados na gema. O objectivo deste trabalho foi purificar anticorpos IgY específicos contra Salmonella spp de galinhas Lohmann Brown. Um grupo de galinhas foi imunizado com um pool de Salmonella entérica subsp entérica serovar Enteritidis e Salmonella enterica subsp entérica serovar Infantis. Estes dois pools de bactérias foram previamente inativados com um tratamento (T1) por forlmaldeído ou com um tratamento (T2) por calor. Os lípidos foram removidos utilizando pectina a 0,1%, a proteína sedimentada com sulfato de amónio (35% p/v) é ressuspensa em tampão PB 0,025M pH 8. Os anticorpos IgY total foram purificados por DEAE celulose. O maior rendimento de IgY total foi de 5,5 mg IgY/mL de gema após o tratamento (T2) aos 63 dias pós-imunização. A caracterização foi realizada pelas técnicas ELISA e MABA e a imunorreatividade foi avaliada por Western blot em anti-soros totais e proteína purificada, hibridizada com anticorpos anti-frango comerciais da SIGMA. A cadeia pesada de 67 kDa e a cadeia leve de 25 kDa foram visualizadas. Tais anticorpos poderão garantir uma proteção rápida e imediata contra vários bioalvos, a nova IgY tem potencial para nanoterapia contra doenças de Salmonelose.