Jornal de Patologia Vegetal e Microbiologia

Abstrato

Transformação genética de plantas de alfafa ( Medicago varia L.) Cultivar doméstico 'Burgaltai' para aumentar o tamanho das folhas

Uuganzaya Myagmarjav*, Enkhchimeg Vanjildorj, Altantsetseg Khajidsuren

A cultivar 'Burgaltai' de alfafa é a forragem mais importante na Mongólia e seu rendimento diminuiu nas últimas décadas devido à polinização cruzada. Este estudo foi conduzido para aumentar o tamanho da folha da cultivar 'Burgaltai' por meio da transformação genética mediada por Agrobacterium transferindo o gene do fator regulador de crescimento AtGRF2 de Arabidopsis thaliana. A regeneração in vitro foi derivada de explantes de hipocótilo e cotilédone de sete dias para indução de calos. Calos induzidos foram usados ​​para indução e proliferação de brotos. Brotos proliferados transportados para meio de indução de raízes. O melhor meio de indução de calos foi o meio MSB5 (meio Murashige Skoog com vitamina Gamborg) suplementado com 2 mg/L de 2,4-D, 0,2 mg/L de BAP e 1 mg/L de NAA, os meios de indução e proliferação de brotos de calos foram meio MSB5 suplementado com 1 mg/L de BAP, 0,1 mg/L de NAA, brotos proliferados foram enraizados em meio MSB5 com metade da força suplementado com 0,5 mg/L de NAA. Para a transformação genética, explantes de hipocótilo foram usados ​​como fonte inicial. No total, 235 explantes foram testados para transformação e 30 explantes (12,7%) foram resistentes aos antibióticos higromicina e regeneraram plântulas. As plântulas foram transferidas para o solo e folhas jovens frescas usadas para ensaio histoquímico GUS e RT-PCR para confirmação. Entre elas, sete mudas transgênicas independentes totalmente regeneradas (T6, 8, 11, 12, 13, 15, 22) foram confirmadas. O tamanho da folha de alfafa cv. transgênica 'Burgaltai' foi aumentado em 0,7 cm ² em comparação ao tipo selvagem. As linhas T6 e 11 apresentaram razão de segregação de 3:1 nas progênies T1 (X2=0,04-0,42, p ≤ 0,52-0,84).