Jornal de Patologia Vegetal e Microbiologia

Abstrato

Formulação de novo método de esterilização de superfície e meio de cultura para o isolamento de actinomicetos endofíticos de plantas medicinais e sua atividade antibacteriana

Waheeda K e Shyam KV

Actinomicetos endofíticos de plantas medicinais foram raramente relatados em comparação com aqueles de fontes marinhas e do solo. Os resultados presentes correlacionam a presença de actinomicetos endofíticos em plantas medicinais isolando-os de três plantas medicinais, ou seja, Ocimum basillicum, Withania somnifera e Rauvolfia tetraphylla. No presente trabalho, o método de esterilização de superfície e o meio foram padronizados e 32 actinomicetos endofíticos foram isolados de três plantas medicinais. Avaliamos a eficiência de quatro métodos diferentes de esterilização de superfície e quatro meios para isolamento de actinomicetos endofíticos. O método com hipoclorito de cálcio, hidrogenocarbonato de sódio e azida de sódio (novo método) usado foi mais eficaz na eliminação de microrganismos epífitos. Entre os quatro meios testados, o ágar caseína de amido (SCA) foi considerado o melhor meio para o isolamento de actinomicetos endofíticos. Conseguimos obter um crescimento rápido e luxuoso de cultura pura de actinomicetos endofíticos em ISP-4 (M) modificado (ágar de solução salina inorgânica) em comparação com ISP-4(S) padrão. O ensaio antibacteriano preliminar de todos os isolados foi testado por teste de confrontação. A triagem secundária de isolados selecionados foi testada por teste de difusão em disco usando extrato de acetato de etila que mostrou atividade antibacteriana de amplo espectro contra patógenos humanos de teste. Com base nos caracteres morfológicos e fenotípicos, 12 isolados foram identificados como Streptomyces spp. Entre 12 isolados, A3 como representante foi caracterizado por SEM e identificado por análise de 16SrRNA como Streptomyces flavoviridis A3WK, mostrou atividade antibacteriana significativa contra patógenos humanos de teste. Este é o primeiro relato de isolamento bem-sucedido de actinomicetos endofíticos das referidas plantas medicinais, para uso de método de esterilização de superfície recentemente formulado e novo estudo comparativo em meio ISP-4.