Jornal de Patologia Vegetal e Microbiologia

Abstrato

Expressão e produção de anticorpos policlonais contra proteína de revestimento recombinante do vírus da necrose do broto de amendoim

Sivaprasad Y, Bhaskara Reddy BV, Sujitha A e Sai Gopal DVR

A estratégia de expressão gênica in vitro foi usada para a produção de antissoro policlonal para a proteína de revestimento (CP) do vírus da necrose do broto de amendoim (PBNV). O gene CP do GBNV do isolado de amendoim foi clonado no vetor de expressão pQE-30UA e transformado em células de Escherichia coli (M15). A expressão do gene CP do GBNV foi induzida in vitro e a proteína recombinante (~34 KDa) foi purificada e usada para imunização de coelhos para produzir o antissoro policlonal específico do GBNV. O antissoro teve um título de 1:5000 em um Ensaio Imunoenzimático (ELISA) indireto e reagiu especificamente em Western blot. O antissoro resultante foi usado para desenvolver um ensaio de Reação em Cadeia da Polimerase de Transcrição Reversa de Imunocaptura (IC-RT-PCR) e comparou seus níveis de sensibilidade com ELISA para detecção de isolados de GBNV. O antissoro recombinante detectou com sucesso a infecção natural do GBNV em culturas economicamente importantes e hospedeiros de ervas daninhas do sul da Índia