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Abstrato
Expansão de células estaminais derivadas do tecido adiposo humano processadas de forma semiautomática em meio suplementado com soro autólogo e antioxidantes
Li-Yi Sun, Dian-Kun Li, Pao-Jen Chen, Yu-Yu Joyce Ho, Jon-Son Kuo, Ching-Feng Cheng, Kuei-Fang Lee, Yao-Jen Chang e Cheng-Yoong Pang
Objectivo: O tecido adiposo excisado (EFT) é uma excelente fonte de células estaminais derivadas do tecido adiposo (ADSCs) para terapia celular autóloga. No entanto, a técnica atual de excisão dos tecidos adiposos com tesouras cirúrgicas convencionais e utilização de meio de cultura contendo soro fetal bovino (SFB) pode não estar em conformidade com as diretrizes das Boas Práticas Teciduais (GTP). Assim, desenvolvemos um processo semiautomático em conformidade com a guideline acima referida para fabricar ADSCs de grau clínico a partir de pequenos volumes de EFT. Métodos: Foi desenvolvido um processo semiautomático utilizando um tubo dispersor descartável operado numa estação de trabalho dispersora de tubos para obter a fração vascular estromal (SVF) da EFT. Um meio de cultura suplementado com soro autólogo humano (HAS) e adjuvante de cultura de células estaminais mesenquimais (MCA) constituído por fator de crescimento de fibroblastos básico (bFGF/FGF-2) e antioxidantes, foi formulado para expandir as ADSCs de SVF em vitro. Resultados: O processo semiautomático pode aumentar significativamente o rendimento celular e reduzir o tempo de operação para picar tecidos de uma hora para alguns minutos. O crescimento das ADSCs foi mais lento no meio HAS a 10% do que no meio suplementado com SFB, mas o seu crescimento no meio HAS a 10% contendo MCA (10% HAS + MCA) foi superior a ambos os meios. O meio HAS + MCA a 10% promoveu também a adipogénese, osteogénese, condrogénese e aumentou a expressão de CD44, CD73 e genes stemness nas ADSCs. Conclusão: O nosso novo processo semiautomático proporciona um isolamento eficiente de SVF, e o meio HAS+MCA a 10% acelera o crescimento de ADSCs a partir de pequenas quantidades de EFT sem perder a sua capacidade de diferenciação.