Asad Ali, Musharaf Ahmad, Hisashi Nishigawa e Tomohide Natsuaki
O vírus do mosaico verde do pepino foi relatado como o vírus mais prevalente e dominante que infecta plantações de cucurbitáceas em KPK, Paquistão. Plantas inoculadas de C. sativus foram tratadas em baixa temperatura para gerar e selecionar uma cepa branda de CGMMV para proteção cruzada. Entre 200 plantas inoculadas durante a seleção de cepa branda, apenas duas não apresentavam sintomas e também eram fortemente positivas no ensaio sorológico, bem como na microscopia eletrônica. Esses dois isolados, designados como Pk-47 e Pk-81, foram selecionados para experimentos subsequentes de proteção cruzada.
Em experimentos em estufa, as plantas de controle começaram a desenvolver sintomas apenas 5 dias após a inoculação e estavam exibindo sintomas severos em 10-12 dias após a inoculação do desafio. As plantas inoculadas com o isolado Pk-47 desenvolveram inicialmente sintomas muito leves que desapareceram em uma semana após o período de inoculação. No teste de proteção cruzada, com os dois isolados selecionados, os sintomas se desenvolveram em plantas que foram inoculadas com desafio 5 ou 7 dias após a inoculação da proteção. As plantas que receberam inoculação do desafio 10 dias após a inoculação da proteção desenvolveram alguns sintomas leves, mas depois mostraram recuperação. Em todos os outros tratamentos (inoculação do desafio feita após 15, 20 e 25 dias após a inoculação da proteção), tanto os isolados leves Pk-47 quanto Pk-81 estavam exibindo habilidades de proteção convincentes para controlar a cepa severa de CGMMV-Pk. A eficácia da proteção cruzada foi avaliada em três temperaturas diferentes (17-22°C, 22-27°C e 27-32°C), e foi observado que funcionou igualmente bem em todas as condições experimentais. Entre os dois isolados, as habilidades de proteção do Pk-81 pareceram ser mais promissoras em comparação ao Pk-47. Todas as plantas permaneceram sem sintomas, por quase dois meses, após a inoculação do desafio. Os resultados experimentais revelaram que a inoculação de proteção pelo menos 15 dias antes da inoculação do desafio servirá melhor.