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Abstrato
Estabelecimento e caracterização de novas células estaminais pluripotentes induzidas por suínos que expressam hrGFP
Yu-Jing Liao, Chia-Hsin Liao, Jiunn-Wang Liao, Kuo Yuan, Yu-Zhan Liu, Yi-Shiou Chen, Lih-Ren Chen e Jenn-Rong Yang
Células -tronco pluripotentes induzidas (iPS) foram estabelecidas em várias espécies animais desde 2006. O porco é um modelo potencialmente útil na medicina regenerativa humana, e as características das células-tronco embrionárias suínas (pES) eram muito semelhantes às células-tronco embrionárias humanas (hES) células. No presente estudo, a proteína fluorescente verde recombinante humanizada rastreável que expressa células estaminais pluripotentes induzidas por suínos (piPS/hrGFP+) foi gerada a partir de fibroblastos de orelha de porco (pEF) pela introdução de quatro fatores de transcrição humanos (Sox2, Oct4, Klf4 e c-Myc) construídos em vetores de lentivírus. As células piPS/hrGFP+ expressaram de forma contínua e constante o sinal hrGFP de forma contínua e constante durante mais de 90 passagens ao longo de 20 meses, apesar de repetidas subculturas. Mantiveram também as características típicas definidas, incluindo a proliferação contínua com estado indiferenciado, a expressão de marcadores de pluripotência pluripotente ES (Oct4, AP, SSEA-3, SSEA-4, TRA-1-60 e TRA-1-81) e a manutenção de um cariótipo normal (36+XY). Três camadas germinativas embrionárias foram também reveladas com sucesso a partir da diferenciação in vitro pela formação de EB. Várias análises histológicas e coloração imunohistoquímica dos teratomas revelaram vários tecidos derivados de três camadas germinativas embrionárias, incluindo tecidos neurais, tecidos epidérmicos contendo queratina, músculo esquelético , músculo liso, cartilagem, tecidos adiposos e estruturas glandulares. Estes resultados suportam que as células piPS/hrGFP+ podem ser geradas a partir de pEF por reprogramação direta, e estas células piPS/hrGFP+ rastreáveis seriam benéficas para aplicação futura em transplante de células e regeneração de tecidos.