Genética hereditária: pesquisas atuais

Abstrato

ELISAs para a determinação de ocratoxina A por anticorpo monoclonal anti-ocratoxina A ou fragmento F(ab')2

Yavor Ivanov

Resumo
AsOcratoxinas são possíveis carcinógenos humanos e o desenvolvimento de imunoensaios sensíveis para a sua determinação em alimentos é uma tarefa muito importante. O objetivo deste estudo foi desenvolver ELISAs sensíveis com base em anticorpos monoclonais (mAb) de ratinho contra a ocratoxina A (OTA) ou o seu fragmento F(ab’)2. O mAb de ratinho foi produzido in vitro utilizando técnicas de cultura de tecidos. A atividade do mAb anti-OTA obtido foi medida. O fragmento F(ab’)2 do mAb anti-OTA foi obtido por hidrólise da pepsina do mAb produzido. Foi realizado um ELISA indirecto utilizando o fragmento F(ab’)2 obtido e o mAb anti-OTA. Foi utilizado o anticorpo secundário marcado com peroxidase. As características analíticas do ELISA indireto com fragmento F(abʹ)2 foram comparadas com as do mAb. A gama linear de OTA em tampão fosfato no imunoensaio com o fragmento F(ab’)2 foi de 0,1 a 100 ng/mL. A gama linear do imunoensaio com todo o mAb anti-OTA foi de 0,1 a 10 ng/mL. Os resultados obtidos foram comparados por mAb de ratinhos certificados contra a ocratoxina A. O intervalo linear com o mAb certificado foi de 1 a 500 ng/mL. Os ELISA desenvolvidos com o fragmento F(abʹ)2 obtido ou o mAb anti-OTA produzido têm a possibilidade de medir baixas concentrações de OTA.