Jornal de Bacteriologia e Parasitologia

Abstrato

Dinâmica e custo de aptidão de Entrobacter cloacae geneticamente modificado expressando defensina para paratransgênese em Phlebotomus papatasi

Rangin Abassi, Maryam Akhlaghi, Mohammad Ali Oshaghi, Amir Ahmad Akhavan, Mohammad Reza Yaghoobi-Ershadi, Rounak Bakhtiary e Fatemeh Mohtarami

Contexto: A bactéria Enterobacter cloacae subsp. dissolvens é um comensal conhecido da microflora intestinal de Phlebotomus papatasi , o principal vetor da leishmaniose cutânea zoonótica, e indicada para paratransgênese em flebotomíneos. Neste estudo, avaliamos a dinâmica e os custos de aptidão da E. cloacae projetada para seu potencial de servir como um "Cavalo de Tróia" em P. papatasi .

Métodos: A cepa projetada de E. cloacae foi transformada com um plasmídeo de proteína fluorescente vermelha expressa constantemente ativa mais defensina (EC-DR) e foi alimentada a colônias de flebotomíneos por meio de alimento larval para larvas. Uma bactéria de tipo selvagem (EC-WT) e alimento intacto foram usados ​​como controles. Caracteres de aptidão, bem como a dinâmica do EC-DR em vários estágios de desenvolvimento de larvas de flebotomíneos foram testados por meio de plaqueamento de espécimes homogeneizados e contagem de colônias expressando fluorescentes no meio de ágar Tet-BHI.

Resultados: Enterobacter cloacae DR produzindo proteína fluorescente vermelha pôde ser isolada do intestino das larvas após 36 dias quando as bactérias foram adicionadas uma vez em vasos larvais. O EC-DR com múltiplas aplicações não teve efeito negativo no tempo de emergência de larvas, pupas e adultos do instar II, mas aumentou ligeiramente a taxa de mortalidade de larvas de P. papatasi . O experimento também confirmou a ausência ou transmissão transestadial fraca de E. cloacae DR em P. papatasi . Ele tem custo de aptidão mínimo no comportamento alimentar e sobrevivência de P. papatasi .

Conclusão: Os resultados deste estudo mostraram que E. cloacae DR é adequado para paratransgênese de P. papatasi apenas no estágio adulto, pois não foi transmitido transestadialmente.