Jornal de pesquisa e terapia com células-tronco

Abstrato

A quinase 1 semelhante à doublecotin aumenta a quimiorresistência das células cancerígenas colorretais através da via anti-apoptose

Lianna Li, Kierra Jones e Hao Mei

Enquadramento: O cancro colorretal (CCR) é o terceiro cancro mais comum diagnosticado e a segunda principal causa de mortes relacionadas com o cancro nos Estados Unidos. Pensa-se que as células estaminais cancerígenas (CSCs) são a principal razão para a recorrência do CCR. Marcador específico de células estaminais, a quinase 1 semelhante à duplacortina (DCLK1) desempenha papéis críticos na tumorigénese e progressão do CCR. A sobre-regulação de DCLK1 está correlacionada com mau prognóstico. Não está claro se o DCLK1 está correlacionado com o aumento da quimiorresistência das células do CCR. O nosso objetivo é revelar a associação do DCLK1 com a quimiorresistência das células CRC e os mecanismos moleculares subjacentes.

Métodos: As células de sobreexpressão DCLK1 estáveis ​​(DCLK1+) foram estabelecidas utilizando as células HCT116 (WT). As células DCLK1+ e WT foram tratadas com 5-Fluorouracilo (5-Fu) em diferentes doses durante 24 ou 48 horas. O ensaio MTT foi utilizado para avaliar a viabilidade celular e foi determinado o IC50 do 5-Fu. A PCR quantitativa em tempo real foi aplicada para determinar a expressão génica de caspase-3 (casp-3), casp-4 e casp-10. A expressão de casp-3 clivada foi investigada através de Western blot e imunofluorescência.

Resultados: Os nossos resultados demonstraram que o IC50 do 5-Fu para as células DCLK1+ foi significativamente superior ao das células WT para o tratamento de 24 e 48 horas (p=0,002 e 0,048 respetivamente), indicando um aumento da quimiorresistência das células DCLK1+. A expressão génica de casp-3, casp-4 e casp-10 foi significativamente inibida nas células DCLK1+ após tratamento com 5-Fu em comparação com as células WT (p=7.616e-08, 1.575e-05 e 5.307e-08 , respetivamente). A quantidade de casp-3 clivada e as células positivas para casp-3 diminuíram significativamente nas células DCLK1+ após o tratamento com 5-Fu em comparação com as células WT (p = 0,015).

Conclusões: Em conclusão, os nossos resultados demonstraram que a sobreexpressão de DCLK1 aumentou a quimiorresistência das células CRC ao tratamento com 5-Fu, suprimindo a expressão génica das caspases chave na via de apoptose e ativação da via de apoptose. O DCLK1 pode ser um alvo terapêutico intrigante para o tratamento eficaz de doentes com CCR.