Ji-Yeon Kim, Sung-Il Kang, Jin Ju Lee, Kichan Lee, So-Ra Sung, Suk Chan Jung, Yong Ho Park, Han-Sang Yoo e Moon Her
Para diagnosticar a brucelose de forma eficaz, muitos métodos de detecção específicos de gênero e espécie baseados em PCR foram desenvolvidos. Com ensaios de PCR convencionais, técnicas de PCR em tempo real foram desenvolvidas como ferramentas de diagnóstico rápido. Entre elas, a PCR em tempo real usando sonda de hibridização (hybprobe) tem sido recomendada para bactérias com alta homologia de DNA entre espécies, com a qual é possível fazer um diagnóstico preciso por meio de uma curva de amplificação e análise de pico de fusão. Uma hybprobe para B. abortus foi projetada a partir de um polimorfismo de nucleotídeo único (SNP) específico no gene fbaA. Esta sonda só mostrou amplificação específica de B. abortus aproximadamente do 14º ciclo, dado um pico de fusão a 69 °C. A sensibilidade da PCR em tempo real foi revelada como sendo 20 fg/μl por diluição de DNA de 10 vezes, e o limite de detecção foi de 4 UFC em amostras clínicas. Esta PCR em tempo real mostrou maior sensibilidade do que a da PCR convencional e da PCR em tempo real anterior baseada na sonda Taqman. Portanto, este novo ensaio de PCR em tempo real pode ser útil para diferenciar a infecção por B. abortus com rapidez e precisão.