Jornal de tecnologia microbiana e bioquímica

Abstrato

Diabético Tipo II relacionado com Anemia

Luljeta Hetemi

Introdução:

O objetivo deste estudo foi: acompanhar os doentes com diabetes tipo II através de testes de: derivados da hemoglobina glicada (HbA1c), mas a importância do método HPLC durante os testes de HbA1c no: diagnóstico, monitorização, seguimento, acesso à diabetes à terapêutica tipo II obteve também resultados de: diabetes, pré-diabetes, inserção de insulina no doente, monoterapia, mas também achados de formas anormais de HgB em doentes diabéticos, como hemoglobinopatias, e durante a pesquisa verificámos que a orientação diagnóstica através de um teste de HbA1c com HPLC está em algumas patologias, que foi ao mesmo tempo preventivo e diagnóstico noutras patologias. A investigação durou mais de 1 ano no centro de diagnóstico médico e laboratorial Olive.

Método:

HPLC (cromatografia líquida de alta eficiência) G8 Tosoh, distribuidor exclusivo: grupo farmacêutico Keis Kosovo. O analisador G8 é a nova geração dos principais sistemas de teste HPLC da Tosoh para resultados rápidos e precisos de HbA1c. O analisador dilui a amostra de sangue total com Hemolysis & Wash Solution e, em seguida, injecta um pequeno volume da amostra tratada na coluna TSKgel Glyco HSi Variant. A separação é conseguida utilizando diferenças nas interações iónicas entre o grupo de troca catiónica na superfície da resina da coluna e os componentes da hemoglobina numa eluição gradiente escalonada. As frações de hemoglobina (designadas como A1a, A1b, F, LA1c, SA1c, A0 e H-V0, H-V1, H-V2) são posteriormente removidas do material da coluna através da realização de uma eluição passo a passo utilizando os Tampões de Eluição HSi Variant 1, 2 e 3 que possuem concentrações específicas de sal e pH. Os componentes separados da hemoglobina passam pela célula de fluxo do fotómetro LED, onde as alterações na absorbância são medidas a 415 nm. O software G8 integra e reduz os dados brutos e depois calcula as percentagens relativas de cada fracção de hemoglobina. A impressão é constituída pelos resultados numéricos e pelo cromatograma. Isto representa as alterações na absorvância versus tempo de retenção para cada fracção de pico. Uma análise requer apenas 1,6 minutos. O estudo foi realizado em 150 doentes, dos quais 80% eram diabéticos tipo II, com idades compreendidas entre os 40 e os 65 anos, com HbA1c a variar entre 6,9 ​​a 11%, HbA de 6 a 8, HbF superior a 1% a 8% (em 48% dos casos era HbF positivo), o grupo controlo eram não diabéticos, suspeitos, dislipidémicos, doentes sem sinais de diabetes tipo II, sendo o motivo do teste porque apresentavam resistência insulínica elevada ou moderada, alguns destes doentes eram portadores de policística síndrome do ovário. Para além da precisão absoluta do método HPLC no teste da HbA1c, neste estudo encontrámos HbF positiva em doentes com diabetes tipo II, o que nos está a levar à anemia, e acredita-se que a causa desta anemia seja o comprometimento da função renal, como a nefropatia diabética - complicação da diabetes tipo II, mas um mecanismo ainda obscuro entre a HbF congénita anormal e a diabetes tipo II permanecerá não envolvido, uma vez que não conseguimos testar todos os doentes para a eletroforese da Hb. A partir destes achados laboratoriais, a HbF resulta num aumento da patologia: para além de ser uma forma congénita inata, o seu nível elevado foi também encontrado em casos de anemia perniciosa, anemia hemolítica, talassemia, tirotoxicose, trombose venosa profunda, etc. LA1c como forma lábil da Hb glicada, pode aumentar em caso de presença de Hb carbamilada (ureia, doentes com doenças renais) e Hb acetilada (abuso de álcool, doenças hepáticas, etc), claro aumento da glicemia.

 Quando o nível de glicose no sangue é elevado, as moléculas de glicose ligam-se aos glóbulos vermelhos, quanto mais tempo ocorre a hiperglicemia, mais a glicose se liga à Hb e maior é a Hb glicada. Assim sendo, neste estudo encontrámos aproximadamente 35% de casos com LA1c positivo, onde a nefropatia diabética já tinha começado, o que foi confirmado pela microalbuminúria positiva, e com relatório do médico nefrologista. Formas anormais de valores de HbF no nosso país, e nestes 150 casos não houve outras formas anormais de Hb, então por outro lado encontramos uma correlação entre HbF positivo tinha aumento fácil ou moderado de homocisteína sérica ou hiper-homocisteinemia e 10% deles eram com mutante MTHFR positivo (cerca de 15% destes doentes que tiveram oportunidade de ser testados, os seus achados laboratoriais foram valores séricos de homocisteína de 15-17, intervalo de referência para adultos 5-15 μmol/L, método Immunoassay-Imulite- 2000 analisadores para o determinação quantitativa L-homocisteína em soro humano (Siemens), e outros dados anamnésicos destes casos foram parcialmente com sinais clínicos como edema nas pernas e dor nas pernas, como sabemos A hiperhomocisteína é um indicador de doença cardiovascular, doença coronária, arteriosclerótica doença precoce, tromboembolismo arterial, e este risco está presente pela Hipercolesterolemia, também pela Homocistinúria como defeitos genéticos.

Resultados:

A homocisteína total (tHcy) emergiu como um importante fator de risco na avaliação de doenças cardiovasculares. de ou metionina através da ação da enzima metionina sintase dependente de folato ou cisteína utilizando a via de transulfuração dependente de B6, folato e dependente de B6 é outra razão para a ligação da anemia com Diabet tipo ll, porque está presente forma HBF positiva que nos contou para mais e mais testes , então isso fez-nos consultar um cirurgião vascular, ele precisa de MTHFR com 2 mutações e outros testes de hemostasia. Os resultados das mutações MTHFR foram do laboratório Synlab na Alemanha. A mutação MTHFR c677T em 11% destes casos foi mutante positiva.

Conclusão:

Concluímos com os factos que o HPLC pode ser livremente chamado de método de diagnóstico padrão-ouro, pois provou ser o melhor método. Risco para pré-diabético, eram 20% dos nossos doentes, com valores de HbA1c entre 6-6,4%, cerca de 10% dos nossos doentes estavam com valores de HbA1c superiores a:6,5%, testados pela primeira vez, que consideram diabéticos, cerca de 25 % estavam com controlo adequado: com valores de 6,6-7%, e controlo inadequado de acordo com ADA (Ameriacn Diabetic Association Criteria's) com valores de 7-8% de HbA1c, cerca de 45% deles. o mesmo doente diabético pode receber um diagnóstico precoce para: complicações da diabetes, tais como lesões renais, lesões hepáticas, anemia, arteriosclerose precoce, tromboembolismo, risco de ICV, etc.