Jornal de Bacteriologia e Parasitologia

Abstrato

Desenvolvimento de PCR aninhado em tempo real sensível para diagnóstico das fases aguda e crônica da toxoplasmose em modelo murino

Parisa Mousavi, Hossein Mirhendi, Hossein Keshavarz Valian, Saeedeh Shojaee, Shirzad Fallahi, Armin Farhang, Mohammad-Ali Mohaghegh e Rasool Jafari

Toxoplasma gondii é um parasita intracelular que causa uma variedade de manifestações clínicas. As fases aguda e crônica da toxoplasmose são consideradas como a presença de taquizoítos proliferando ativamente nas células nucleadas de hospedeiros mamíferos, como humanos, e se espalham pelo sangue para outras partes do corpo, o que subsequentemente forma cistos teciduais. O presente estudo teve como objetivo avaliar o valor diagnóstico da reação em cadeia da polimerase (PCR) aninhada em tempo real para as fases aguda e crônica da toxoplasmose em camundongos de laboratório, em comparação com a PCR em tempo real convencional. Para induzir a toxoplasmose aguda, 103 taquizoítos da cepa Toxoplasma gondii RH foram inoculados intraperitonealmente em 25 camundongos BALB/c. Para induzir a toxoplasmose crônica, os camundongos foram infectados subcutaneamente pelo parasita e então tratados com sulfadiazina do primeiro ao décimo quarto dia após a injeção. O DNA genômico foi extraído do sangue e dos tecidos cerebrais. Foi realizada PCR em tempo real e aninhada em tempo real visando o elemento repetido de 529 pb (RE). Todos os camundongos com infecção aguda foram positivos para Toxoplasma gondii usando PCR em tempo real aninhada e 21 foram positivos por PCR em tempo real. Na fase crônica, todas as amostras de sangue foram negativas com PCR em tempo real e três foram positivas usando PCR em tempo real aninhada. No entanto, das 25 amostras de cérebro, 28%, 52% e 72% foram positivas com os métodos microscópico, PCR em tempo real e PCR em tempo real aninhada, respectivamente. Os resultados do presente estudo mostraram que os métodos moleculares têm alta sensibilidade para o diagnóstico de toxoplasmose aguda. Na fase crônica, uma amostra de sangue não é adequada para a detecção da infecção, e outras amostras de tecido podem ser usadas em seu lugar. Além disso, a PCR em tempo real aninhada tem sensibilidade ainda maior em comparação com a PCR em tempo real convencional.