Jornal de Patologia Vegetal e Microbiologia

Abstrato

Desenvolvimento de PCR Multiplex para detecção específica de Xanthomonas campestris pv. campestris em repolho e correlação com incidência da doença

RK Roohie e S Umesha

Podridão negra, a doença mais séria das crucíferas, especialmente Brassica oleracea var. capitata (repolho), causa enormes perdas de rendimento. Podridão negra é uma doença transmitida por sementes e a avaliação das sementes para o patógeno é muito crucial. As sementes de repolho foram testadas para infecção por X. campestris pv. campestris por análise bioquímica e PCR. As amostras de sementes foram submetidas à análise de PCR com três primers, dos quais um dos pares de primers específicos para o gene hrpF pôde detectar o patógeno da podridão negra. O estudo atual é o primeiro do gênero em que as cultivares de repolho disponíveis localmente foram avaliadas usando ensaios moleculares e as cultivares amplamente cultivadas na área de estudo foram verificadas quanto à correlação entre os desempenhos de laboratório e de campo. O objetivo do estudo foi usar os procedimentos baseados em PCR específicos e sensíveis disponíveis para detecção de rotina de X. campestris pv. campestris em sementes de repolho. A PCR multiplex foi padronizada para a detecção simultânea do patógeno e espécies de Brassica, espaçador transcrito interno (ITS) em sementes e material foliar infectados. As impressões digitais de PCR multiplex foram obtidas, as quais amplificaram um fragmento de 619 pb do gene hrpF de X. campestris pv. campestris e uma seção de 360 ​​pb da região espaçadora transcrita interna de Brassica sp. O ensaio também detectou prontamente infecções por X. campestris pv. campestris em plantas doentes e de colônias bacterianas isoladas em meios seletivos, e foi mais sensível e específico do que os métodos tradicionais de plaqueamento. Assim, pelo uso de PCR multiplex, a determinação do nível limite para detecção bacteriana em sementes de repolho foi possível.