Pharmaceutica Analytica Acta

Abstrato

Desenvolvimento e Validação do Método LC-MS/MS para Determinação de Maleato de Trimipramina em Plasma Humano

Venkata Sairam Koganti, Sekuri Shashidhar Reddy, Jyothigoudapura Channabasappa Thejaswini e Gurupadayya Bannimath

Um método simples e sensível de cromatografia líquida-espectrometria de massas em tandem (LC-MS/MS) foi desenvolvido para a determinação de maleato de trimipramina em plasma humano usando dicloridrato de opipramol como padrão interno (ISTD). O analito e o ISTD foram isolados do plasma pelo método de precipitação de proteínas usando metanol. A separação cromatográfica foi realizada na coluna ZORBAX ECLIPSE XDB-C18 (4,6 x 150 mm, 5 µm). A eluição foi feita com fase móvel isocrática composta de formato de amônio 5 mM com ácido fórmico 0,1% e metanol na proporção de 25:75 (v/v) a uma vazão de 1,0 ml/min. Trimipramina e Opipramol foram detectados com adutos de prótons em m/z 295,20→100,10 e m/z 364,30→171,20 no modo positivo de monitoramento de reações múltiplas (MRM), respectivamente. O tempo de retenção de Trimipramina e ISTD foi de 1,67 min e 1,48 min, respectivamente. As curvas de calibração foram lineares na faixa de concentração de 0,1 a 100,1 ng/ml. O limite inferior de quantificação foi de 0,1 ng/ml. O método foi validado pelas diretrizes da EMEA (Agência Europeia de Medicamentos) para linearidade, exatidão e precisão, fator de matriz, recuperação, seletividade e estabilidade. Os parâmetros de validação foram considerados bem dentro do limite de aceitação.