Pharmaceutica Analytica Acta

Abstrato

Desenvolvimento e validação de um método de cromatografia líquida de alta pressão indicador de estabilidade para determinação de prostaglandina E1 e seus produtos de degradação em formulação intracavernosa sn

Victoire Vieillard, Ghorbel N, Deffaux C, Astier A, Yiou R e Paul M

Uma nova formulação intracavernosa para superar a falha dos tratamentos padrão de disfunção erétil após prostatectomia radical foi desenvolvida. Esta formulação contém prostaglandina E1 (pGE1) a 15 μg/ml em associação com papaverina e urapidil a 15 mg/ml e 2,5 mg/ml respectivamente. Como pGE1 foi o principal composto a ser sujeito à degradação físico-química, sua degradação e a aparição concomitante de seu produto de degradação prostaglandina A1 (pGA1) estão correlacionadas à estabilidade da formulação. A baixa absorbância específica de PGE1 na região ultravioleta e a presença de altos níveis de papaverina e urapidil na formulação foram as principais dificuldades para desenvolver um novo método para determinação simultânea de pGE1 e pGA1. Muitas composições e pH da fase móvel foram estudados para encontrar as melhores condições cromatográficas, e o método escolhido é um método de ensaio de cromatografia líquida de alta eficiência (RP-HPLC) de fase reversa em rampa sensível, preciso e exato. A separação por RP-HPLC de rampa foi obtida em uma coluna Kromasil 5 C18 (250×4,6 mm id, tamanho de partícula de 5 μm) usando fase móvel composta de tampão fosfato de acetonitrila-pH 3 (37: 63%, v/v). A detecção foi realizada a 205 e 230 nm para PGE1 e pGA1, respectivamente, usando um detector UV multionda. O método foi validado para especificidade, linearidade, precisão, exatidão, robustez e sensibilidade. Os limites de quantificação foram cerca de 3 μg/ml para pGE1 e 0,5 μg/ml para pGA1. A presença de urapidil e papaverina em alta concentração não interferiu na determinação de pGE1 e pGA1 na formulação. O método desenvolvido que separa todos os produtos de degradação formados sob uma variedade de condições foi sensível, seletivo, linear, preciso e exato e, portanto, pode ser usado para estudar a estabilidade da formulação.