Pharmaceutica Analytica Acta

Abstrato

Desenvolvimento e Validação de um Método Simples e Rápido de Eletroforese Capilar em Zona para Quantificação de Heparina em um Produto Farmacêutico e Estudos de Estabilidade

Elnaz Tamizi e Abolghasem Jouyban

Um método simples e rápido de eletroforese capilar de zona foi desenvolvido e validado para determinação de heparina em um produto farmacêutico e avaliação da estabilidade da heparina sob diferentes condições de estresse. A melhor separação foi obtida por um capilar de sílica fundida nua (50 μm id; 50 cm total e 41,5 cm de comprimento efetivo), tampão fosfato (pH=3,50, 72 mM) a 35°C, injeção hidrodinâmica a 50 mbar por 40 segundos e voltagem aplicada de -30 kV. A heparina e os produtos de degradação de força foram detectados por um detector de matriz de fotodiodo a 200 nm e 257 nm, respectivamente. O método proposto foi validado em termos de linearidade, exatidão, precisão, limite de quantificação (LOQ) e limite de detecção (LOD). Para avaliação da estabilidade da heparina, soluções de heparina foram submetidas a condições de estresse térmico (90 ± 1°C), ácido (pH=2,00, 70 ± 1°C) e básico (pH=12,00, 70 ± 1°C), além de exposição à luz solar (no laboratório). Os resultados indicaram que o método foi linear na faixa de 0,312 a 15,0 mg/ml com LOD de 0,078 mg/ml e LOQ de 0,312 mg/ml, preciso (entre 97,27% e 101,0%) e exato (precisão intradiária de 0,28 a 1,8 e precisão interdiária de 0,78 a 3,2%). O tempo de migração da heparina sob condições otimizadas foi de 2,39 ± 0,03 minutos e os produtos de degradação forçada foram separados em 7 minutos. O conteúdo de heparina no produto farmacêutico quantificado pelo método foi de 99,58 ± 0,70% da alegação do rótulo. Enquanto isso, o método pode mostrar as mudanças no eletroferograma da heparina, também a formação de produtos de degradação sob diferentes condições de estresse. Portanto, o método proposto pode ser aplicado como uma técnica rápida e adequada para determinação de heparina em formas farmacêuticas e estudos de estabilidade.