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Abstrato
Desenvolvimento e teste de amostras de ensaio para sorodiagnóstico específico de Fasciola gigantica por meio de avaliação externa de qualidade
Vu Quang Huy, Tran Thien Trung, Ha Manh Tuan, Vu Chi Thanh, Le Van Chuong, Nguyen Lam Duc Vu, Huynh Thi Diem Phuc, Bui Quang Sang
Objetivo: Construir um procedimento para produção de amostras para sorodiagnóstico específico de anticorpos anti- Fasciola gigantica por meio de um esquema externo de avaliação de qualidade e avaliar a homogeneidade e estabilidade das amostras do ensaio.
Métodos: Neste estudo experimental, amostras continham um anticorpo anti- Fasciola gigantica de acordo com a triagem por ELISA, seguido de confirmação por Western blotting foram coletadas. Todas as amostras foram testadas e consideradas negativas para outros helmintos, especialmente anticorpos de trematódeos. As amostras também foram negativas para anticorpos anti-HIV-1 e -2, anticorpos anti-HCV e antígeno HBs. As amostras foram preparadas por métodos de liofilização e congelamento, a estabilidade e homogeneidade foram avaliadas a cada 2, 4, 8, 12 e até 24 semanas.
Resultados: Produzimos três lotes de amostras de soro contendo anticorpos anti- Fasciola gigantica em três níveis. O lote DK1 teve densidade óptica, OD=0,350 ± 0,037; os lotes DK3 e DL3 tiveram O=0,653 ± 0,046, e o lote DL1 teve OD=0,850 ± 0,047 com o comprimento de onda de 450 nm. Os anticorpos IgG específicos contra antígenos de Fasciola gigantica foram considerados positivos para todas as três proteínas, proteína de 8–9 kDa (P 8-9), 28 kDa (P 28) e 42 kDa (P 42) pela técnica de Western blot. As amostras do ensaio foram confirmadas como homogêneas pelo teste de Fisher (estatística F 0,05), bem como estáveis durante 24 semanas (com estatística t 0,05).
Conclusão: Amostras de teste para sorodiagnóstico específico de anticorpos anti- Fasciola gigantica por meio de avaliação externa de qualidade podem ser produzidas com homogeneidade e estabilidade por 24 semanas por métodos de liofilização e congelamento.