Jornal de Bioequivalência e Biodisponibilidade

Abstrato

Determinação de Aprepitante em Plasma Humano Usando LC-MS/MS com Ionização por Electrospray

Ravi Prakash PVDLS, Sumadhuri B e Srikanth M

Um método preciso, sensível e de alto rendimento de cromatografia líquida-espectrometria de massas em tandem (LC-MS/MS) para determinação de Aprepitant (APT) em plasma humano foi desenvolvido e validado usando Quetiapina (QTP) como padrão interno. O analito e o padrão interno foram extraídos do plasma humano usando extração líquido-líquido. A separação cromatográfica foi realizada na coluna Discovery C18 10 cm×4,6 mm, 5 μm com uma fase móvel isocrática composta de 5 mM de Acetato de Amônio (pH 4,00): Acetonitrila (10:90), a uma vazão de 0,9 ml/min. A detecção MS-MS foi realizada em um espectrômetro de massa tandem AB Sciex API 3200 operado em monitoramento de reação múltipla (MRM) no modo positivo em m/z 535,10/277,10 e 384,00/253,10 para APT e QTP, respectivamente. Uma faixa dinâmica linear de 10,004-5001,952 ng/ml para APT foi avaliada com coeficiente de correlação médio (r) de 0,9991. A precisão do ensaio (expressa como coeficiente de variação, CV) foi menor que 15% em concentrações de LQC, MQC, HQC e foi menor que 20% para LLOQQC. As recuperações percentuais para APT em amostras de controle de alta, média e baixa qualidade foram de 71,9%, 68,0% e 63,8%, respectivamente, e para o padrão interno de 77,7%. O analito foi considerado estável ao longo de cinco ciclos de congelamento-descongelamento, bancada, extrato úmido, extrato seco, amostrador automático e estudos de estabilidade provisórios. Portanto, o método proposto foi considerado adequado para a análise de controle de qualidade de rotina do Aprepitant em plasma humano em estudos de bioequivalência.