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Abstrato
Detecção de 5-carboxilcitosina no ADN de células de mamíferos
Yihua Gao, Jian Li, Bin Chen, Qingjin Yang, Junjie Zhang, Lijian Zhang, Qionglin Huang, Xiaoxia Ye e Chun Cai
A 5-carboxilcitosina (5caC) é um importante derivado da modificação da citosina na via de desmetilação do ADN. No entanto, a quantificação precisa de 5caC é um desafio, especialmente em tecidos de mamíferos. Esta situação resulta provavelmente da quantidade vestigial de 5caC nos mamíferos e da sensibilidade inadequada das tecnologias existentes. Aqui, relatamos um novo método LC-MS/MS para quantificar com precisão o 5caC em células de mamíferos. O reagente padrão 5caC foi sintetizado e o ADN genómico foi hidrolisado com ácido fórmico e o composto alvo 5caC foi detetado por HILIC LC-MS/MS. Os resultados mostraram que o 5caC existe geralmente em órgãos de ratinhos e tecidos cancerígenos. O conteúdo de 5caC no cérebro dos ratinhos foi mais elevado do que nos pulmões e no fígado, e foi obviamente diminuído nos tecidos de cancro colorretal em comparação com o tecido adjacente. Este resultado sugere que o 5caC se associa provavelmente à tumorigénese e desempenha um papel dominado no controlo epigenético da função neuronal.