Jornal de Bacteriologia e Parasitologia

Abstrato

Detecção, Identificação e Teste de Suscetibilidade de Bactérias por Citometria de Fluxo

Sabine Nuding e Lutz T Zabel

A citometria de fluxo permite a análise simultânea de vários parâmetros de células eucarióticas, bem como microrganismos, tornando-a uma ferramenta poderosa para diferenciação e análise funcional. No entanto, a aplicação da citometria de fluxo em microbiologia clínica ainda é pouco frequente. Aqui, relatamos o desenvolvimento de ensaios citométricos de fluxo para detectar e identificar bactérias e determinar a suscetibilidade a antibióticos. O teste de suscetibilidade de um amplo espectro de isolados de cultura bacteriana foi baseado no oxonol DiBAC4(3) e posteriormente modificado para permitir o teste de suscetibilidade usando espécimes como hemoculturas ou swabs. Além disso, um ensaio estendido foi desenvolvido para a detecção rápida de
Staphylococcus aureus resistente à meticilina (MRSA) dentro de 6 horas a partir de swabs. Os resultados de 402 testes de suscetibilidade citométrica de fluxo foram confirmados por difusão em disco de ágar Bauer-Kirby ou sistemas automatizados com uma concordância média de 94%. Este ensaio trouxe uma economia de tempo essencial de um dia, particularmente no que diz respeito a bactérias produtoras de beta lactamase estendidas (ESBL). Testes de suscetibilidade realizados diretamente de hemoculturas positivas ou de swabs aumentaram ainda mais a rapidez. Os resultados de suscetibilidade de cepas bacterianas testadas diretamente de hemoculturas atingiram uma concordância de 89% em comparação com o Vitek® 2. Investigando 140 swabs de triagem de pacientes colonizados com MRSA e de suas pessoas de contato,
22 swabs foram identificados corretamente como contendo MRSA, 2 amostras de MRSA não foram identificadas devido à falta de expressão da proteína A das cepas de MRSA. Classificações falsas como swabs positivos para MRSA não ocorreram. A citometria de fluxo oferece uma técnica adequada para a rápida detecção, identificação e teste de suscetibilidade de bactérias com grande potencial.