Bioquímica clínica e médica

Abstrato

Detecção e caracterização molecular de células tumorais circulantes (CTCs) em doentes com melanoma metastático: uma potencial aplicação da biópsia líquida

Suresh M Kumar

Anticorpo anti-NG2 específico para melanoma conjugado com nanopartículas de óxido de ferro que foram desenvolvidas para isolar, detetar e cultivar CTCs de modelos de xenoenxerto de melanoma e sangue de doentes com melanoma metastático. O processo de enriquecimento envolvido, a lise de glóbulos vermelhos de amostras de sangue utilizando tampão de lise de glóbulos vermelhos, aumenta a recuperação das células cancerígenas por marcação e separação imunomagnética. A captura celular eficiente foi validada utilizando células cancerígenas marcadas com fluorescência inseridas em sangue humano saudável e a utilidade clínica foi demonstrada em amostras de doentes com melanoma metastático. A experiência de adição resulta com uma recuperação superior a 70% em quatro conjuntos experimentais. Modelo de melanoma de metástase espontânea, verificou que o número de CTCs aumentou durante a progressão do tumor e correlacionou-se com o desenvolvimento de metástases linfáticas e pulmonares in vivo. Foram detetadas CTC em 6 de 7 amostras de sangue de doentes que continham melanoma metastático. As CTCs foram positivas para marcadores moleculares específicos de melanoma, como S100, HMB45, MelaA, MITF e as CTCs foram positivas para coloração anti-NG2-Q-dot e pERK2-Q-dot. O padrão de expressão do gene BRAFV600e resultou que as CTCs foram expressas em BRAFV600e à semelhança das células de melanoma de controlo. O método de isolamento de nanopartículas de anticorpos de óxido de ferro é um método de deteção altamente fiável e económico de CTCs de doentes com melanoma metastático e as células CTCs podem ser cultivadas para estudos analíticos adicionais ou potenciais testes de sensibilidade a medicamentos.