Jornal de pesquisa e terapia com células-tronco

Abstrato

A expressão diminuída da angiopoetina 1 em células estaminais mesenquimais perivasculares de doentes com Ssc induz um efeito antiangiogenético, quando co-cultivado com células endoteliais

Paola Di Benedetto, Vasiliki Liakouli, Francesco Carubbi, Piero Ruscitti, Onorina Berardicurti, Ilenia Pantano, Antonio Francesco Campese, Edoardo Alesse, Isabella Screpanti, Roberto Giacomelli e Paola Cipriani

Introdução: O sistema Angiopoietina (Ang)/Tie2 desempenha papéis cruciais nas funções vasculares, regulando a interação endotelialpericítico e promovendo a estabilização vascular. Avaliámos se uma conversa cruzada prejudicada, na Esclerose Sistémica (ES), entre células endoteliais (CEs) e células estaminais mesenquimais perivasculares (CTMs) pode afetar a interação normal entre Ang1, Ang2 e Tie2, contribuindo assim para uma angiogénese prejudicada na ES.
Métodos: Investigamos a Ang1, a Ang2 e os seus recetores realizando coculturas com CEs e CTMs de medula óssea obtidas de doentes e controlos saudáveis ​​(HC). Após 48 horas, as células foram triadas e analisadas para ensaios moleculares. Além disso, investigámos, por ensaio ELISA, as proteínas libertadas nos sobrenadantes. Por fim, silenciamos a expressão de Ang-1 em HC-MSCs por siRNA-Ang1.
Resultados: A nível molecular, as CTM-ES, cultivadas isoladamente, expressaram uma menor quantidade de Ang1 quando comparadas com as CTM-HC. Após a co-cultura, observou-se uma diminuição significativa dos níveis de mRNA de Ang1 nas ES-MSCs/ES-ECs. Pelo contrário, os ES-EC expressaram níveis mais elevados de Ang2 e Tie2 em cada condição de co-cultura, quando comparados com as expressões das células cultivadas isoladamente. Os ensaios WB e ELISA refletiram os resultados observados na expressão génica. As HC-MSCs transfectadas com siRNA-Ang1 não tinham a capacidade de suportar a formação de estrutura semelhante a um tubo.
Conclusões: Neste trabalho, fornecemos evidências de que um desequilíbrio das moléculas Ang1/Ang2 e uma diminuição da expressão do seu recetor, Tie2, durante a interação CEs-MSCs perivasculares, podem modular a estabilidade dos vasos e a formação de tubos vasculares, contribuindo assim para a alteração angiogénica observada durante a ES.