Bioquímica e Bioquímica Analítica

Abstrato

Imobilização covalente de lactato oxidase em nanopartículas de sílica revestidas de zircónia/filme híbrido de quitosano para determinação amperométrica de lactato

Kusum Dagar e Pundir CS

Foi construído um biossensor amperométrico de L-lactato melhorado com base na imobilização covalente de lactato oxidase (LOx) em nanopartículas de sílica revestidas de zircónia (SiO2@ZrONPs)/quitosana (CHIT) filme híbrido eletrodepositado na superfície de um elétrodo de ouro (AuE ). O elétrodo enzimático foi caracterizado por voltametria cíclica (CV), microscopia eletrónica de varrimento (MEV), espectroscopia de infravermelhos com transformada de Fourier (FTIR) e espectroscopia de impedância eletroquímica (EIS), enquanto que SiO2@ZrONPs foram sintetizados pelo método de redução química e caracterizados por microscopia eletrónica de transmissão (TEM), espectroscopia UV e difração de raios X (XRD). O biossensor apresentou uma resposta ótima em 3s a pH 7,5 em tampão fosfato de sódio 0,05M e 30°C, quando operado a 20 mVs-1. O biossensor tinha um limite de deteção baixo de 0,2 nM com uma ampla gama de trabalho/linear entre 0,1 – 4000 μM. O biossensor foi empregue para a medição do nível de ácido L-láctico no plasma de pessoas aparentemente saudáveis ​​e doentes. A recuperação analítica do ácido láctico adicionado (5,0 mM e 10,0 mM)) no plasma foi de 99% e 96,6%, respectivamente. Os coeficientes de variação dentro e entre lotes foram de 1,79% e 2,89%, respetivamente. Verificou-se uma boa correlação (R2=0,99) entre os valores de lactato plasmático medidos pelo método espectrofotométrico enzimático padrão e o presente biossensor. O elétrodo enzimático foi utilizado 160 vezes durante um período de 120 dias, quando armazenado seco a 4ºC.