Jornal de Patologia Vegetal e Microbiologia

Abstrato

Comparação de DAC-ELISA e imunoensaio de Tissue Blot para a detecção de Acidovorax avenae subsp. avenae, agente causal da Red Strip of Sugarcane

Syed Zia-Ul-Hussnain, Rauf CA, Haque MI, Shahid Afghan, Tariq Mukhtar, Farah Naz, Kausar Nawaz Shah M e Aamir Shahazad

O Direct Antibody Coating Enzyme Linked Immunoassay (DAC-ELISA) e o Tissue Blot Immunoassay (TBIA) foram comparados para detecção de Acidovorax avenae subsp. avenae (Aaa) em amostras de cana-de-açúcar pesquisadas em 2010 e 2011. Um total de 27 clones de cana-de-açúcar continham duas amostras de plantas sintomáticas, que foram testadas simultaneamente por ambos os testes sorológicos. Os resultados obtidos dos testes DAC-ELISA mostraram que 11 das 27 amostras testadas de clones de cana-de-açúcar estavam infectadas com Aaa e 16 estavam livres de bactérias; enquanto que, em amostras duplicadas, apenas 7 amostras foram positivas para Aaa usando o TBIA. As membranas TBIA mostraram coloração azul escura nas 7 positivas e 20 negativas. Concluiu-se que o DAC-ELISA teve falsos positivos nos 4 clones (SPF-238, CP77-400, SPF-213 e GT-11) que foram negativos usando TBIA. O tempo do ensaio também foi minimizado na realização do teste TBIA como equivalência ao DAC-ELISA. Em relação ao tempo de execução do teste, pelo menos 25-30 horas foram consumidas para a conclusão do ensaio DAC-ELISA, enquanto apenas 6-9 horas foram necessárias para o ensaio TBIA com resultados confiáveis. Ambos os ensaios deram Aaa positivo para os clones HoSG-315, CPSG-437, NSG-49, CPSG-2453, CP-NIA-82-223, CSSG-2402 e US-114. Os testes TBIA foram distintos com resultados positivos e negativos claros com erro diagnóstico mínimo. Por outro lado, o ensaio quantitativo de bactérias é uma característica significativa do DAC-ELISA, mas leituras de baixa densidade óptica acima do fundo foram inconsistentes com o TBIA e foram consideradas resultados falso-positivos. Entre a variedade de testes imunológicos disponíveis no Paquistão, o imunoensaio de blotting de tecido (TBIA) é mais útil na detecção de infecções latentes em materiais vegetais.