Jornal de pesquisa e terapia com células-tronco

Abstrato

A co-cultura de células EndoC-βH1 humanas produtoras de insulina com células estaminais da crista neural com tampa limite protege parcialmente contra a morte celular induzida por citocinas

Anongnad Ngamjariyawat, Svitlana Vasylovska, Kyril Turpaev, Phillippe Ravassard, Nils Welsh, Elena Kozlova e Rikard G Fred

Recentemente observámos que a co-cultura de células beta de ratinhos e ratos com células estaminais da crista neural de fronteira de ratinho (bNCSCs) protegeu contra a morte de células beta induzida por citocinas inflamatórias, possivelmente através de junções directas célula a célula mediadas por caderina. No entanto, não foi abordado se também as células beta humanas podem ser protegidas através desta estratégia. Se possível, seria uma abordagem importante para o desenvolvimento de novos protocolos para melhorar os resultados do transplante de ilhotas em doentes com diabetes tipo 1. O objectivo desta investigação foi, portanto, estudar o efeito da co-cultura de bNCSC com células EndoC-βH1 humanas produtoras de insulina na morte celular induzida por citocinas. Para este efeito, os bNCSCs positivos para GFP foram cultivados juntamente com células EndoC-βH1 humanas negativas para GFP na presença das citocinas IL-1γ (50 U/ml) e IFN-γ (1000 U/ml). As células foram depois coradas com iodeto de propídio e tripsinizadas para análise citométrica de fluxo. A análise da fluorescência do iodeto de propídio em células positivas para GFP e negativas para GFP revelou que as células EndoC-βH1 morreram em menor extensão quando co-cultivadas com bNCSCs do que quando cultivadas sem bNCSCs. Observámos também que as células EndoC-βH1 formaram N-caderina, mas não junções de E-caderina com os bNCSCs. A população de células bNCSC continha uma grande proporção de células que expressam beta-tubulina, indicando diferenciação neuronal. Uma função protectora das junções da N-caderina foi verificada pela descoberta de que um anticorpo neutralizante da N-caderina neutralizou o efeito da co-cultura. Concluímos que a interação entre as células produtoras de insulina humana e as bNCSCs resulta numa menor suscetibilidade das células produtoras de insulina às citocinas pró-inflamatórias in vitro.