Hassan Dana, Ali Mazraeh, Ghanbar Mahmoodi Chalbatani, Vahid Marmari, Habibollah Mahmoodzadeh, Ali Ghamari, Fateme Moazzen, Mohammad Ebrahimi e Narges Mehmandoost
Introdução: ALCAM como uma glicoproteína é um membro da família das imunoglobulinas e desempenha um papel importante no crescimento, sobrevivência e motilidade celular. Esta proteína também contribui para o desenvolvimento de invasão tumoral em cânceres colorretais e de mama e é tipicamente considerada um marcador de células-tronco cancerígenas. ALCAM como um antígeno de superfície celular, com alta expressão em alguns cânceres como colorretal e de mama, tem o potencial de diagnosticar e tratar esses cânceres. Objetivos: Assim como outras proteínas de membrana, ALCAM representa um alvo potencial para terapia de cânceres colorretais e de mama, portanto, este estudo tem como objetivo clonar e expressar domínios C2 e V para serem usados em planos práticos, diagnósticos e corretivos. Métodos: Neste estudo, a sequência de domínios C2 e V foi otimizada para expressão em hospedeiro procariótico usando ferramentas online e clonada em plasmídeos de expressão pET-28a. Células E. coli BL21 (DE3) foram transformadas por plasmídeos recombinantes pET-28a usando o método de choque térmico e a expressão dos domínios V e C2 recombinantes foi examinada pela técnica SDS-PAGE. Resultados: Os genes sintéticos dos domínios C2 e V foram localizados entre os sítios de restrição NcoI/BamHI e XhoI e clonados no vetor pBSK (+). A presença desses genes em pET28a foi determinada por colônia e confirmada por digestão de restrição. Gens dos domínios C2 e V foram expressos em E. coli BL21 DE3. Os resultados da técnica SDSPAGE confirmaram a expressão dos domínios C2 e V recombinantes de 23 e 29 kDa em um sistema de expressão bacteriana. Conclusões: Os genes dos domínios C2 e V foram expressos como recombinantes em E. coli. Esses fragmentos recombinantes podem ser introduzidos como candidatos diagnósticos e corretivos para triagem e terapia do câncer em pacientes com câncer colorretal e de mama.