Jornal de pesquisa e terapia com células-tronco

Abstrato

Diferenciação condrogénica de células estaminais derivadas do tecido adiposo por estimulação elétrica por radiofrequência

María Luisa Hernández-Bule, María Ángeles Trillo, María Ángeles Martínez-García, Carlos Abilahoud e Alejandro Úbeda

Objectivo: Embora as terapias de transferência eléctrica capacitiva-resistiva (CRET), baseadas na aplicação transdérmica de correntes de radiofrequência electrotérmicas, tenham demonstrado uma eficácia terapêutica promissora na regeneração de lesões teciduais traumáticas ou degenerativas, os seus potenciais efeitos em tecidos como a cartilagem, com fraca capacidade regenerativa, têm não sido suficientemente estudado. Aqui investigamos os efeitos da exposição a uma corrente de 448 kHz normalmente utilizada na terapia CRET, na diferenciação condrogénica precoce de células estaminais humanas derivadas do tecido adiposo (ADSC).

Materiais e métodos: Células estaminais obtidas de dadores saudáveis ​​foram diferenciadas em meio condrogénico durante 16 dias. Durante os últimos 2 dias de incubação, as culturas foram expostas intermitentemente ou expostas de forma simulada a uma corrente de onda sinusoidal de 448 kHz, administrada a uma densidade subtérmica de 50 μA/ ^mm2 . A resposta celular foi avaliada por: ensaio de proliferação XTT, quantificação de glicosaminoglicanos (GAG) e colagénio (análise de imagens, ensaio Blyscan e imunoblot) e análise da expressão dos fatores condrogénicos Sox5 e Sox6, e do fator de transcrição ERK1/2 e seu ativo forma p-ERK1/2 (imunoflorescência, imunotransferência e RT-PCR).

Resultados: O estímulo elétrico aumentou significativamente os níveis de colagénio tipo II específico da cartilagem e de GAG ​​na matriz extracelular das culturas em diferenciação. Embora não tenham sido observadas alterações na expressão dos genes SOX no final do tratamento de 48 horas, o estímulo induziu uma sobreexpressão significativa dos fatores de transcrição L-Sox5, Sox6 e p-ERK1/2. Uma vez que estas proteínas são reguladores cruciais da síntese da matriz extracelular durante a diferenciação condrogénica, é provável que a sua sobre-expressão esteja envolvida nos aumentos observados no conteúdo de colagénio extracelular e GAG.

Conclusão: O presente conjunto de dados suporta a hipótese de que a componente elétrica do tratamento eletrotérmico aplicado nas terapias CRET poderá estimular a reparação da cartilagem, promovendo a diferenciação condrogénica. Estes dados, juntamente com resultados previamente reportados de que o tratamento in vitro com o mesmo tipo de sinal elétrico subtérmico promove a proliferação de ADSC indiferenciadas, identificam fenómenos moleculares subjacentes aos potenciais efeitos reparadores e regenerativos de tais correntes de radiofrequência.