Ali Heydari, Gholam Khodakaramian e Doostmorad Zafari
A alfafa (Medicago sativa) é a forragem mais importante na província de Hamedan, localizada no oeste do Irã. Em condições de campo, as plantas apresentaram atrofiamento do crescimento, clorose e sintomas de murcha não relatados anteriormente. Para pesquisar o agente causal da doença, plantas sintomáticas foram coletadas da principal área de cultivo de alfafa nesta província. Amostras de plantas foram desinfetadas, moídas em tampão fosfato e um loop cheio da suspensão preparada foi esfregado em meio de ágar nutriente contendo 5% de extrato de levedura e 1% de glicerol. O isolamento e a caracterização do agente causal, especialmente de plantas no estágio primário de crescimento da doença, são difíceis. Bactérias isoladas causaram murcha e clorose após 40 dias em plantas de alfafa, em condições de estufa. A determinação da característica fenotípica das bactérias isoladas, juntamente com duas cepas definidas, por métodos bacteriológicos padrão indicou que elas pertencem a P. viridiflava. O ensaio de PCR confirmou os resultados da identificação do agente bacteriano causal, determinado por métodos clássicos. Isolados bacterianos representativos testados mostraram uma banda de PCR de 860 pb, usando primers projetados para sequência de rDNA 16S de P. viridiflava LMG 2352T (cepa tipo). Esta nova bactéria relatada é o segundo agente bacteriano patogênico, que causa perdas na produção de alfafa na província de Hamedan, no Irã.