Jornal de pesquisa e terapia com células-tronco

Abstrato

Caracterização de marcadores de superfície de hidratos de carbono em células estaminais embrionárias de ratinhos

Zhenwei He, Yue An, Gang Shi, Yingwei Lin, Jiliang Hu e Yali Li

A glicosilação de proteínas e lípidos na superfície celular demonstrou ser importante na manutenção da pluripotência e do destino das células estaminais em células estaminais embrionárias. As lectinas têm sido amplamente utilizadas para caracterizar modificações de hidratos de carbono na superfície celular de células estaminais embrionárias para determinar a pluripotência e o destino das células estaminais. No presente estudo, foi utilizado um painel de 14 lectinas e anticorpos contra hidratos de carbono para caracterizar os marcadores de superfície de hidratos de carbono de células estaminais embrionárias (ES) de ratinho. As células ES de ratinho positivas para SSEA-1 foram primeiramente enriquecidas e o perfil de hidratos de carbono das células foi determinado por citometria de fluxo e imunocitoquímica. O enriquecimento de células ES de ratinho rendeu aproximadamente 99,95 ± 0,87% de células ES de ratinho positivas para SSEA-1. Foi observada uma percentagem uniforme e elevada de ligação para o PNA, DSL, JAC, GNL, PSA e LTL, sendo que o PNA, DSL, JAC e GNL apresentaram uma percentagem semelhante de ligação ao SSEA-1 (99,9%), enquanto a ligação do PSA e LTL foi de aproximadamente 95% -99%. A ligação parcial de WFL, SNA e AAL foi observada em células ES de ratinho, o que foi também refletido pelas respetivas imagens de imunocitoquímica. Observou-se uma percentagem muito baixa de ligação para o MAA e UEAI. Os dados mostraram que a elevada expressão de manose, N-acetilactosamina e galactose está presente na superfície celular das células ES de ratinho. Alguns marcadores de superfície fiáveis ​​que podem ser utilizados para determinar a pluripotência são o PNA, DSL, JAC e GNL, que mostraram uma ligação semelhante ao SSEA-1, um marcador pluripotente bem estabelecido. Em conjunto, os dados forneceram informações sobre o perfil de hidratos de carbono da superfície celular das células ES de ratinho.