Jornal de Ciência e Tecnologia de Membranas

Abstrato

Investigação de imagem Terahertz sem câmara da interação da proteína do fator XII com o estrato córneo humano

Zia Shariat-Madar, Aunik Rahman, Bozena Michniak-Kohn, Guacyara Da Motta, Anis Rahman*

Este artigo relata a utilização da técnica de imagem terahertz sem câmara para medir alterações conformacionais do fator zimogénio XII (FXII) em solução e após ligação ao estrato córneo na ausência do seu complexo potencializador endógeno conhecido, o cininogénio de alto peso molecular (HK) -Prekallikrein ( PK) em tempo real. O FXII é sintetizado no fígado e segregado para a circulação para servir como fator de coagulação sanguínea. O FXII tem diversas funções biológicas. Em primeiro lugar, serve como molécula acessória para prolongar a geração de adesão plaquetária induzida pela trombina à monocamada plaquetária inicialmente formada. Em segundo lugar, o FXII fornece um estímulo robusto para a hiperpermeabilidade induzida pela bradicinina (BK), rompendo as barreiras vasculares. Utilizando ensaios in vitro, estudos demonstraram que a ativação do FXII pode ocorrer em superfícies carregadas negativamente. Esta ativação é acelerada na presença de calicreína ou pré-calicreína ativada (PK). Demonstramos o nosso método medindo as alterações conformacionais que ocorrem após a ligação do FXII no estrato córneo. O assunto da ativação do FXII continua a ser um trabalho em progresso. Anteriormente, a Reflectometria de Varrimento Terahertz (TSR) e a Espectrometria Terahertz (TS) foram utilizadas para demonstrar que diferentes desvios da densidade espectral do sinal se devem às alterações estruturais e à ativação do FXII induzida pelo estrato córneo hidratado. O presente trabalho utiliza imagens de Terahertz (THz) para demonstrar que um subconjunto do zimogénio FXII se liga ao estrato córneo. O FXII não foi significativamente acumulado no estrato córneo hidratado. No entanto, foi observado FXII ativado formado (FXIIa) no estrato córneo. Esta descoberta sugere que uma superfície carregada negativamente não é uma condição necessária.