Revista de Farmacologia Clínica e Experimental

Abstrato

Rastreio baseado no promotor BTF3 de compostos anti-cancro da mama humana

Kavita Rawat, Wahajul Haq, Raj Kamal Tripathi*

O Fator de Transcrição Básico 3 (BTF3) é um fator de transcrição conhecido por se expressar diferencialmente em diferentes formas de cancro; onde no cancro gástrico, o silenciamento da apoptose induzida pelo BTF3. Anteriormente, reportámos que o fragmento de caseína β humana 54-59 (NS) modula negativamente a expressão de BTF3 em células THP-1 humanas. No presente estudo, desenvolvemos um modelo in vitro dirigido ao promotor BTF3 para o rastreio de compostos que regulam negativamente o BTF3 e para estudar o impacto da regulação negativa do BTF3 na apoptose na linhagem celular MCF-7. Confirmámos ainda a eficácia do NS para regular negativamente o BTF3 em células MCF-7 através de western blotting. O NS e os seus análogos AN1, AN2 e AN3 foram rastreados na construção do promotor-repórter BTF3 durante a transfecção transitória na linhagem celular MCF-7, onde se descobriu que a expressão do repórter era regulada negativamente após o tratamento. Este estudo foi ainda confirmado por imunotransferência que produziu resultados semelhantes em células MCF-7. Para determinar a função biológica na supressão da expressão de BTF3 por NS e análogos, foram realizados ensaios de viabilidade celular e coloração com Anexina-V-FITC, os resultados demonstraram claramente um aumento da apoptose na regulação negativa de BTF3 em células MCF-7. Em conclusão, a expressão de BTF3 é um biomarcador crucial na terapia do cancro da mama e o nosso modelo pode ser uma vantagem para o rastreio rápido de compostos que modulam a expressão de BTF3 em diferentes formas de cancro, onde se encontra sobre-expresso.