Bioquímica e Bioquímica Analítica

Abstrato

O sangue amostrado através de manchas de sangue seco (DBS) exibe um metabolismo ex vivo diminuído em comparação com o sangue total através do uso de uma abordagem metabolómica de marcação de isótopos cinéticos

Collin Hill, Jeremy Drolet, Mark D Kellogg, Vladimir Tolstikov, Niven R Narain e Michael A Kiebish

O sangue é a matriz primária para o perfil metabólico, fornecendo um meio para a identificação de biomarcadores, análise farmacocinética/farmacodinâmica e monitorização de doenças. As metodologias convencionais de colheita de amostras de sangue requerem sangue colhido por punção venosa. No entanto, esta técnica permite a atividade metabólica ex vivo residual da matriz sanguínea, apresentando assim um desafio para a captura de uma leitura fisiologicamente representativa do metaboloma. O sangue que não é imediatamente processado fica sujeito a longos períodos de metabolismo ex vivo. Mesmo quando as amostras são transportadas por armazenamento refrigerado, alguns processos enzimáticos permanecem ativos. A técnica de colheita de sangue seco (DBS) torna as células metabolicamente inativas num curto espaço de tempo. Demonstramos que o sangue total depositado num cartão de DBS diminui a captação e o metabolismo da glicose U13C após 4 horas, tal como analisado por espectrometria de massa. As células também não apresentam atividade metabólica adicional até 24 horas, enquanto o sangue armazenado num tubo de colheita continua a absorver e metabolizar ativamente a glicose U13C até 24 horas após a colheita. Dado que a glicólise é uma das vias mais ativas nas células sanguíneas, a capacidade de interromper o metabolismo da glicose num curto espaço de tempo é importante para captar com precisão o perfil do metabolito no momento da recolha. Afirmamos que este se estende provavelmente para além do metabolismo da glicose, uma vez que as células sanguíneas são capazes de absorver outros nutrientes extracelulares. Acreditamos que a colheita de sangue através da técnica DBS oferece uma leitura informativa do metaboloma, em comparação com a colheita de sangue convencional, que é crítica para a saúde da população e para as aplicações em medicina de precisão.