Biologia e Medicina

Abstrato

Caracterização biológica e efeitos in vitro da preparação de fator de crescimento humano concentrado: uma abordagem inovadora para a regeneração de tecidos

Elisa Borsani, Veronica Bonazza, Barbara Buffoli, Marco Angelo Cocchi, Stefania Castrezzati, Giorgio Scarì, Francesco Baldi, Stefano Pandini, Stefano Licenziati, Silvia Parolini, Rita Rezzani e Luigi F Rodella

Enquadramento científico: Os concentrados de plaquetas são hoje amplamente aplicados em diferentes campos clínicos para melhorar a regeneração óssea e dos tecidos moles. “Fatores de Crescimento Concentrados” (CGF) é uma nova geração de produtos concentrados de plaquetas, que apresenta um interessante potencial de aplicação clínica e biotecnológica.
Objectivo do estudo: O objectivo deste estudo é avaliar a justificação biológica para a utilização de CGF, avaliando a localização das células sanguíneas, a libertação cumulativa in vitro de sete factores de crescimento (PDGF-AB, VEGF, TNF-α, TGF- β1 , BDNF, BMP-2 e IGF-1), os seus efeitos in vitro na proliferação celular e o seu comportamento mecânico.
Métodos: Os CGF foram obtidos de dadores voluntários. A localização das células sanguíneas foi avaliada após coloração morfológica adequada e imunohistoquímica. A quantidade de libertação de factores de crescimento foi medida às 5 horas, 1, 3, 6, 7 e 8 dias, utilizando o ensaio ELISA. As células foram cultivadas com e sem CGF e a sua proliferação foi avaliada após 72 horas, realizando a quantificação do Ki-67, através de citometria de fluxo (FACS). A resposta mecânica do CGF à compressão também foi tentada.
Resultados: Os resultados mostraram que as plaquetas e os leucócitos se encontravam num espaço muito fino denominado “buffy coat”, localizado entre a parte branca e vermelha do CGF. Cada fator de crescimento avaliado teve uma libertação cinética específica com grande variabilidade entre sujeitos. A proliferação celular in vitro foi estimulada. O CGF apresentou “plasticidade aparente” e a sua resposta mecânica foi influenciada pela estrutura da rede de fibrina. Conclusão: Estes resultados apoiam a utilização clínica do CGF e permitir-nos-ão compreender melhor e melhorar os resultados clínicos.