Jornal de Distúrbios do Sangue e Transfusão

Abstrato

A ligação do fator VIII aos nanodiscos lipídicos aumenta sua função de coagulação em um modelo murino de hemofilia A

Keri Csencsits-Smith, Krill Grushin e Svetla Stoilova-McPhie

Contexto: Hemofilia A é um distúrbio congênito de sangramento causado por fator VIII defeituoso ou deficiente (FVIII). A forma ativa do FVIII é o cofator para o fator IXa da serina protease (FIXa) no complexo tenase intrínseca ligado à membrana (FVIIIa-FIXa). A montagem do complexo FVIIIa-FIXa na superfície plaquetária ativada é crítica para a coagulação sanguínea bem-sucedida.

Objetivos: Caracterizar o papel dos nanodiscos lipídicos (ND) para a função do FVIII in vivo e testar o ND lipídico como um sistema de entrega para o FVIII. Avaliar o potencial de ligação do FVIII recombinante ao ND como tratamento melhorado para a Hemofilia A.

Métodos: O FVIII suíno recombinante (rpFVIII) foi expresso e caracterizado em solução e quando ligado ao ND. Os complexos rpFVIII, ND e rpFVIII-ND foram caracterizados por microscopia eletrônica de transmissão. Estudos funcionais foram realizados usando testes aPTT e estudos de corte de cauda resolvidos no tempo de camundongos hemofílicos.

Resultados: O rpFVIII funcional foi montado com sucesso no ND lipídico. Quando injetados em camundongos hemofílicos, os complexos rpFVIII-ND mostraram um efeito pró-coagulante pronunciado, que foi mais forte do que o do rpFVIII sozinho. Enquanto a injeção do ND sozinho mostrou um efeito pró-coagulante, esse efeito não foi aditivo, implicando que os complexos rpFVIIIIND têm um efeito sinérgico no processo de coagulação em camundongos hemofílicos.

Conclusões: A ligação do rpFVIII ao ND antes de sua injeção em camundongos hemofílicos melhora significativamente a função terapêutica da proteína. Isso representa um passo significativo em direção a uma nova abordagem para modular a coagulação sanguínea no nível do FVIII ligado à membrana e a montagem do complexo tenase intrínseco.