Bioquímica e Bioquímica Analítica

Abstrato

Desenvolvimento e Validação de um Método Analítico para a Determinação de Ensaio de Fármacos Antibacterianos Cloridrato de Besifloxacina e Fenoxietanol em Formulação de Gel

Pradeep Kumar, Neelam Pawar*, Neha Minocha, Kavita Bahmani, Asha Poonia

Objectivo: O objectivo do presente trabalho é desenvolver um método analítico e validá-lo para a determinação de um ensaio de formulação antibacteriana em gel.

Enquadramento: A validação de método analítico é um processo que envolve estudos de confirmação de que procedimento/método/sistema/analista fornece resultados precisos e reprodutíveis reconhecidos por estudos de laboratório de investigação de que as características de desempenho da técnica atendem às necessidades exigidas para as aplicações analíticas.

Objectivo: Melhorar as condições e parâmetros que devem ser seguidos no desenvolvimento e validação através do desenvolvimento de um novo método RP-HPLC sensível e preciso? Validar os métodos propostos recentemente desenvolvidos de acordo com os parâmetros analíticos mencionados nas guidelines IP, USP, BP e ICH.

Métodos: O método HPLC foi validado para indicar que o procedimento analítico utilizado é adequado para a utilização pretendida, utilizando vários parâmetros como a especificidade, linearidade, LOD, LOQ, precisão, exatidão, alcance, robustez, estabilidade na solução analítica e adequação do sistema.

Resultados: Os tempos de retenção padrão do fármaco besifloxacina foram de 7,781 min e a amostra foi de 7,731, respetivamente. A área da besifloxacina padrão foi de 1.828.547 e a área da amostra foi de 1.825.315. Os tempos de retenção para o padrão do medicamento Fenoxietanol foram de 2,010 min e a amostra foi de 2,004, respetivamente. A área do fenoxietanol padrão foi de 438.025 e a área da amostra foi de 438.103. Na adequação do sistema, o RSD para 5 injecções replicadas para cada pico é de 0,33%. Nos picos de especificidade do Diluente, o Placebo e as Impurezas não estão a interferir com os picos da Besifloxacina. Os picos de besifloxacina foram considerados puros. Verificou-se que os produtos de degradação estavam bem separados do pico da besifloxacina. O fator de pureza de pico foi NLT 0,9995. No estudo de precisão System Precision RSD do tempo de retenção para a besifloxacina obtido a partir de seis injeções replicadas de 0,33%. O RSD da área de besifloxacina obtida a partir de seis injecções repetidas é de 0,46%. A precisão do método RSD foi calculada em 6 determinações. O valor do ensaio do medicamento besifloxacina é de 0,56%. O RSD calculado em 6 determinações para o valor do ensaio do medicamento besifloxacina é de 0,50%. Na precisão intermédia, o RSD foi calculado em 6 determinações para o valor do ensaio do medicamento besifloxacina é de 0,50%. O RSD calculado em 12 determinações (precisão do método e precisão intermédia) para o valor do ensaio é de 0,50%. Estabilidade na solução analítica para o padrão e para a amostra, a diferença de área do pico da besifloxacina foi encontrada dentro de ± 2,0% da linearidade inicial. O coeficiente de correlação e o coeficiente de regressão (R ​​quadrado) não devem ser inferiores a 0,995 para a Besifloxacina. A % de interceção deve estar dentro de ± 5,0% da resposta ao nível de 100% Precisão ao nível de 50% e 150%: o RSD é de 0,01%. Precisão ao nível de 50% e 200%: o RSD encontrado foi de NMT 2,0%. Precisão média% de recuperação em cada nível encontrada entre 98 a 101% do medicamento besifloxacina. O RSD em 9 (3 níveis x3) determinações é de 1,2, que segue os critérios do intervalo de 2% do NMT. Foi encontrada uma correlação de 1,0% para os parâmetros de precisão e linearidade.

Conclusão: A recuperação está entre 98% a 101% e a % RSD para todos os valores de recuperação é de 1,41%, o que está dentro dos limites. No método HPLC, as condições foram otimizadas para obter uma separação adequada dos compostos eluídos.