Jornal de Pesquisa e Desenvolvimento em Aquicultura

Abstrato

Análise da Expressão e Modulação de Transcritos de Genes Muunerelacionados Seleccionados na Linhagem Celular DLEC de Robalo Europeu ( Dicentrarchus labrax L.)

Francesco Buonocore*, Elisa Randelli, Niels Lorenzen, Katja Einer-Jensen, Giuseppe Scapigliati

As linhas celulares foram estabelecidas a partir de diferentes espécies de peixes, especialmente para o isolamento de vírus e para estudar as interações célula-patógeno e, por isso, são de interesse na aquacultura . Neste artigo, investigámos a presença e a regulação de alguns genes imunitários na linhagem celular DLEC (células embrionárias de Dicentrarchus labrax) do robalo-europeu (Dicentrarchus labrax L.) para elucidar preliminarmente a sua ação. A expressão basal dos genes selecionados (interleucina-1? (IL-1?), ciclooxigenase-2 (COX-2), fator de crescimento transformador-? (TGF-?), CD8-?, complexo principal de histocompatibilidade II-? ( MHC II-?), interferão (IFN) e proteína Mx (Mx)) foram investigados e, sucessivamente, a sua modulação foi estudada tanto após estimulação com diferentes agentes mitógenos como após transfecção com uma sequência codificante da proteína capsidial de um vírus da necrose nervosa dos peixes (NNV). Os resultados evidenciaram que as moléculas inflamatórias (IL-1?, COX-2, TGF-?), expressas constitutivamente pela linhagem celular DLEC, não são reguladas positivamente pela estimulação com lipopolissacárido (LPS) de E. coli, quer a expressão dos transcritos dos marcadores de células T (CD8-?, MHC II-?) é influenciada pela ação de uma lectina de Phaseolus vulgaris (PHA-L). Por fim, a expressão da proteína NNV do revestimento na linhagem celular DLEC, após transfecção, levou a uma elevada regulação positiva dos transcritos dos genes IFN e Mx. Estes dados sugerem que a linhagem celular DLEC reconhece padrões moleculares específicos associados a patogénicos (PAMPs) e, por isso, pode ser útil para estudar as vias das células T e as respostas virais no robalo, evitando a utilização de animais de teste vivos.