Pharmaceutica Analytica Acta

Abstrato

Um método melhorado e sensível para estimativa de vitamina D3 por RPHPLC

Subodh Kumar, Diwesh Chawla e Ashok Kumar Tripathi

Apesar da abundância de luz solar, a deficiência de vitamina D (VDD) na Índia é uma epidemia. 50-90% da população entre todas as faixas etárias estão associadas à VDD. Entre os métodos comuns (RIA, imunoensaio etc.) disponíveis para estimativa de vitamina D, o método analítico como HPLC é considerado um padrão ouro. No estudo proposto, desenvolvemos um método RP-HPLC para a estimativa de vitamina D3 com maior precisão e exatidão. A separação foi obtida na coluna C18 no modo isocrático usando duas fases móveis diferentes, ou seja, acetonitrila: metanol (método I) e metanol: água com 0,1% de ácido fórmico (método II). A coluna foi mantida a 40 °C e a fase móvel foi bombeada a uma vazão de 0,4 mL min−1. A detecção do eluente foi realizada em λmax 265 nm. O tempo de retenção da vitamina D3 para o método I e II foi de 7,14 e 7,01 minutos, respectivamente, com R2>0,99. As curvas padrão foram lineares na faixa de concentração de 0,5-5 ng mL−1. Os valores de LOD e LOQ para vitamina D3 para o método I e II foram de 1,64, 5,02 e 1,10, 3,60 ng mL−1, respectivamente. A porcentagem de recuperação foi de 69-79% e 75-87% para o método I e II, respectivamente. A % RSD de precisão intra e inter-dia do método I foi de <2 e <7%, enquanto que, para o método II, <2 e <4%, respectivamente. Em conclusão, o método II mostrou maior precisão e exatidão e também custo-efetivo, portanto, pode ser usado para estimativa de vitamina D3 em escala laboratorial.