Jornal de Bioequivalência e Biodisponibilidade

Abstrato

Uma abordagem sistemática para superar o efeito de matriz durante a análise LC-ESI-MS/MS por diferentes técnicas de extração de amostra

Chinmoy Ghosh, Shashank Gaur, Chandrakant P. Shinde e Bhaswat Chakraborty

O efeito de matriz (ME) é uma grande preocupação durante qualquer análise LC-ESI-MS/MS. Ele afeta a reprodutibilidade, a sensibilidade e a confiabilidade dessas técnicas analíticas. No entanto, não há abordagens padronizadas disponíveis para superar os problemas relacionados ao ME. A abordagem varia de molécula para molécula. Aqui, examinamos que a técnica de extração de amostra é uma abordagem para superar o ME durante a bioanálise LC-MS/MS. Três tipos de técnicas de extração convencionais, ou seja, precipitação de proteína, extração líquido-líquido e extração em fase sólida (SPE), foram usadas durante a extração de nevirapina do plasma humano. Foi observado que a amostra de nevirapina, quando preparada por SPE, elimina ou reduz drasticamente os MEs ipso facto. As amostras precipitadas de proteína apresentaram o maior grau de ME com fator de matriz médio de 0,30; a extração líquido-líquido teve um fator de matriz médio de 0,80; e o fator de matriz obtido pela extração em fase sólida foi de 0,99. Diferentes fosfolipídios foram identificados realizando a varredura de íons precursores em m/z 104 e 184, que interferiram com o analito durante a eluição cromatográfica. A partir do experimento, foi observado que fosfolipídios retidos por muito tempo tiveram papel significativo no ME. Portanto, é uma boa prática observar os fosfolipídios durante a varredura de precursores por um período que seja pelo menos três vezes o tempo real de execução analítica. Entre todas as técnicas de extração aplicadas, a extração em fase sólida produz a amostra mais limpa, e a precipitação com metanol produz a amostra mais suja devido à alta solubilidade dos fosfolipídios nela.