Jornal de tecnologia microbiana e bioquímica

Abstrato

Uma técnica de ensaio de placas baseada em corantes rápida e eficiente para o rastreio de estirpes fúngicas produtoras de L-asparaginase

Vaishali P e Bhupendra NT

A enzima L-Asparaginase tem recebido grande atenção devido ao seu potencial como medicamento anticancerígeno e agente de processamento de alimentos. Os micróbios produtores de L-asparaginase são convencionalmente seleccionados em placas de vermelho de fenol contendo L-asparagina como única fonte de azoto para o seu crescimento. Contudo, o contraste da zona nas placas de vermelho de fenol não é muito distinto. Para ultrapassar este problema, é necessária uma metodologia alternativa para o rastreio de estirpes fúngicas produtoras de L-Asparaginase extracelular. Na presente investigação comparativa, é relatado um método melhorado de rastreio, em que o Vermelho de Alizarina S e o 4-Nitrofenol estão implícitos como indicadores de pH. As placas que contêm Alizarin Red S e 4-nitrofenol são incolores a pH ácido, tornando-se rosa e amarelas, respetivamente, a pH alcalino. Assim, forma-se uma zona rosa escura e amarela em redor das colónias microbianas produtoras de L-asparaginase, diferenciando entre produtores e não produtores de enzimas. Assim, relatamos que o vermelho de alizarina S e o 4-nitrofenol podem detetar a produção da enzima anticancerígena a uma concentração de corante muito mais baixa, que parece ser mais precisa e distinta do que o método convencional para o rastreio de fungos produtores de L -Asparaginase extracelular.