Bioquímica e Bioquímica Analítica

Abstrato

Um novo polímero com impressão molecular para a remoção seletiva da hemoglobina interferente antes da análise do sangue total

Tumelo Hendrick Tabane e Bareki Shima Batlokwa

Uma proteína globular vermelha pesada, a hemoglobina, responsável pela pigmentação vermelha do sangue total, interfere frequentemente na identificação e quantificação de biomarcadores associados a doenças do sangue total, no campo do diagnóstico molecular. O principal desafio é a introdução direta de sangue total como amostra nos instrumentos de análise devido à sua complexidade fisiológica e natureza “suja”. Por exemplo, o pigmento vermelho no sangue total, que é caracterizado como “sujidade”, geralmente co-elui com os biomarcadores e mascara-os da fácil separação cromatográfica antes da sua detecção final. Também obstrui os componentes do instrumento, tais como as colunas de separação que são conhecidas por serem sensíveis, conduzindo assim a resultados imprecisos e imprecisos durante o bioensaio. Para fazer face a estes desafios, o nosso laboratório sintetizou um polímero novo, seletivo, eficaz e robusto com impressão de hemoglobina, na forma de pó, através de polimerização de radicais livres em massa, empregando tecnologia de impressão molecular, para remover seletivamente a hemoglobina interferente de amostras de sangue total antes da instrumentação. A partir dos resultados, o pó de polímero removeu eficazmente a hemoglobina da amostra de sangue total, como demonstrado pela redução da absorvância no ultravioleta-visível de 0,794 Au para valores mais baixos de 0,193 Au antes e depois da aplicação do pó de polímero, respetivamente . Experimentalmente, o pó tinha uma elevada capacidade de ligação à hemoglobina alvo, como demonstrado pela elevada eficiência de remoção percentual de 76% das soluções padrão de hemoglobina, quando comparado com a sua baixa capacidade de ligação a uma espécie análoga, (clorofila), a 32% da clorofila. Além disso, o pó de polímero mostrou ser robusto, uma vez que removeu a interferência da hemoglobina da matriz complexa "suja" de amostras reais de sangue total humano até 74% de remoção de hemoglobina, o que foi comparável a 76% de remoção de hemoglobina de padrões puros, portanto, o polímero em pó pó demonstrou que pode funcionar eficazmente em diversos ambientes de matriz limpa e suja. Além disso, o pó de polímero apresentou-se como uma ferramenta pré-analítica de limpeza de sangue total eficiente, seletiva e não destrutiva que, com mais investigação, poderá substituir as estratégias convencionais de limpeza de sangue total, destrutivas e não seletivas, como a centrifugação comummente empregada.