Abstrato

Um novo teste ELISA sanduíche que deteta simultaneamente as proteínas E7 do HPV-16, 18 e 45 em esfregaços cervicais

Christina Metzger, Annabella Pittl, Andreas M. Kaufmann, Theodoros Agorastos, Kimon Chatzistamatiou, Oliver Böcher, Werner Zwerschke, Haymo Pircher, Isabel Koch e Pidder Jansen-Dürr

As infeções persistentes por papilomavírus de alto risco (HPV) são o principal fator etiológico do cancro do colo do útero , e as oncoproteínas E7 têm sido sugeridas como novos marcadores de progressão tumoral. O objetivo deste estudo foi gerar um novo sistema de deteção baseado no Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA) para monitorizar a expressão das proteínas E7 dos tipos de HPV de alto risco (hrHPV) HPV-16, HPV-18 e HPV-. em esfregaços cervicais. Utilizando uma combinação de anticorpos monoclonais de coelho criados contra proteínas E7 do HPV-16 e HPV-18/HPV-45, respetivamente, foi desenvolvido e validado um E7-ELISA trivalente, utilizando proteínas E7 recombinantes de vários tipos de HPV e lisados ​​​​de E7-positivos. A quantidade de 0,5 picogramas de proteína E7 por poço foi determinada como limite de deteção. O E7-ELISA foi utilizado para determinar os níveis de proteína E7 em esfregaços cervicais obtidos de um total de 67 mulheres. A concentração da proteína E7 estava abaixo do limite de deteção em todos os esfregaços HPV negativos, e foram encontradas concentrações de proteína E7 acima do valor basal em algumas amostras cervicais HPV positivas. Em conjunto, o trabalho aqui descrito fornece uma nova ferramenta para a deteção simultânea das proteínas E7 dos três tipos mais prevalentes na neoplasia cervical hrHPV.

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