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Abstrato
Um nested PCR de alta sensibilidade para deteção de Toxoplasma gondii em amostras de animais e alimentos
Maria Vitale, Paola Galluzzo, Vittoria Currò, Kataryna Gozdzik, Domenico Schillaci e Vincenzo Di Marco Lo Presti
O Toxoplasma gondii é um importante parasita transmitido por alimentos e água em todo o mundo. Os tecidos e as amostras de carne de muitos animais de sangue quente podem conter quistos teciduais de toxoplasmose crónica. A água e os vegetais podem ser contaminados pelos oocistos do parasita eliminados pelas fezes dos gatos infectados, representando o hospedeiro definitivo do parasita.
É descrita uma PCR sensível para detecção de Toxoplasma gondii. A primeira etapa amplificou a região entre o rDNA 28S e 18S nos estreitamente relacionados T. gondii e Neospora caninum; A análise RFLP distinguiu o ADN dos dois parasitas morfologicamente idênticos. Embora o N. caninum não esteja envolvido na transmissão humana, até à data é importante para a saúde animal, pois é um dos principais responsáveis pelo aborto em bovinos.
O nested PCR foi utilizado num ensaio de diluição em amostras de salsicha de porco enriquecidas com ADN do parasita T. gondii. A análise mostrou que puderam ser detectados até 200fg equivalentes a apenas dois parasitas únicos. Limite de deteção semelhante para T. gondii pode ser obtido com PCRs em tempo real, mas os métodos em tempo real necessitam de consumíveis especiais e equipamentos dispendiosos.